產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01428 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 乳腺癌;雌性;BALB/cfC3H |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠高轉(zhuǎn)移性細(xì)胞直銷
簡稱:4T1.2
種屬:小鼠
來源:;雌性;BALB/cfC3H
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE01428
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠高轉(zhuǎn)移性細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Ranolazine di 中文名:鹽酸雷諾嗪 分子式:C24H35Cl2N3O4 吩嗪甲酯 1g
Ranolazine 中文名:雷諾嗪 分子式:C24H33N3O4 PhenMethosulfate 5g
Ranitidine 中文名:鹽酸雷尼替丁 分子式:C13H23ClN4O3S 植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Ranitidine 中文名:雷尼替丁 分子式:C13H22N4O3S 植物(ETH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Raltegravir 中文名:雷特格韋 分子式:C20H21FN6O5 植物血凝素/凝集素(PHA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Sarafloxacin 中文名:鹽酸沙拉沙星 分子式:C20H18ClF2N3O3
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T Sarmentocymarin 中文名: 分子式:C30H46O8 度:98.0%
豬胰島素樣生長因子2 英文名稱: Porcine Insulin like Growth Factor 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGF-2 Stauntosaponin A 1417887-91-2 中文名: 分子式:C28H38O7
豬胰島素樣生長因子1elisa試劑盒 豬胰島素樣生長因子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬胰島素樣生長因子1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬胰島素樣生長因子1試劑盒、豬胰島素樣生長因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Sarsasapogenin 中文名:菝葜皂苷元 分子式:C27H44O3 度:99.0%
豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Sarafloxacin 91296-87-6 中文名:鹽酸沙拉沙星 分子式:C20H18ClF2N3O3 度:98.0%
5-Formyl-2-furylboronic acid 中文名: 分子式:C5H5BO4 度:98.0% 激酶(PK)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
1-Methyl-aminomethyl naphthalene 中文名: 分子式:C12H13N 度:98.0% 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II試劑盒(琥珀酸-輔酶Q還原酶)
Terbinafine 中文名:特比萘芬 分子式:C21H25N 度:98.0% 蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒(測血清、組織)(紫外比色法)
N-[3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-6-iodoquinazolin-4-amine 中文名: 分子式:C21H14ClFIN3O 度:98.0% 超微量Ca-ATP酶測定試劑盒
3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 中文名: 分子式:C13H9ClFNO3 度:98.0% 超微量Ca2+Mg2+-ATP酶測定試劑盒(比色法)
小鼠高轉(zhuǎn)移性細(xì)胞直銷兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Acetophenone tosylhydrazone 4545-21-5 中文名:苯乙酮對甲苯磺?;?/span> 分子式:C15H16N2O2S
兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin 中文名:1-芐基-5-乙氧基海因 分子式:C12H14N2O3 度:98.0%
兔子細(xì)胞間粘附分子2elisa試劑盒 兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒、兔子細(xì)胞間粘附分子2eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Abscisic acid 14375-45-2 中文名:脫落酸 分子式:C15H20O4 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Abscisic acid 中文名:脫落酸 分子式:C15H20O4 度:99.0%
兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit ELISA. 96T/48T 9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene 117344-32-8 中文名:9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴 分子式:C29H26O4
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。