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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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河弧菌(VF)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P63993
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-28
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P63993
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

河弧菌(VF)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR)

50T

BK-P63993

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 76,54,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Mumeose K  中文名:  分子式:C25H32O15  度:93.0%

小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Mumeose K  中文名:  分子式:C25H32O15 

小鼠血小板因子3(PF-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Lithocholic acid  434-13-9  中文名:石膽酸  分子式:C24H40O3 

小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Mumeose K  2132384-01-9  中文名:  分子式:C25H32O15  度:93.0%  關(guān)鍵詞: 

小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Tetracycline  中文名:四環(huán)素  分子式:C22H24N2O8
上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL扁桃苷/苦杏仁苷質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAmygdalin

U2OS-Luc teT-on細(xì)胞,熒光素酶轉(zhuǎn)染成細(xì)胞 枯草芽孢桿菌 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Amygdalin

CCL3 Protein Human 重組 CCL3 / Mip1a 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸阿比朵爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Arbidol HCl

LoVo(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2  EDNRB / Endothelin B Receptor 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿加曲班質(zhì)量規(guī)格:>99%,,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)Argatroban

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6阿加曲班(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Argatroban
成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰苯二甲腈(>99.0%(GC))Phthalonitrile質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)

WB-F344細(xì)胞,大鼠肝上皮樣干細(xì)胞 HL-60(原髓細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C34-丙氧基苯二甲腈(>95.0%(GC))4-Propoxyphthalonitrile質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)

EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)4-戊氧基苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Pentyloxyphthalonitrile質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

ZR-75-1(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK-四氟鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))Tetrafluorophthalonitrile質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

細(xì)胞;EC1091,2-萘二甲腈(>98.0%(GC))1,2-Naphthalenedicarbonitrile質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
2,4-Dihydroxypyridine  中文名:  分子式:C5H5NO2    緊張素Ⅰ   英文名稱:   Angiotensin   英文縮寫:   ANG   規(guī)格:   48T/96T

2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine  中文名:  分子式:C5H4N2O4    緊張素Ⅱ   英文名稱:   Angiotensin    英文縮寫:   ANG   規(guī)格:   48T/96T

2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol  中文名:2,4-(α,α-二甲基苯甲基)苯酚  分子式:C24H26O    緊張素1   英文名稱:   Human Angiotensin 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   AT1

2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  中文名:  分子式:C13H16FN3O6    緊張素2受體1抗體   英文名稱:   Human Angiotensin 2 receptor 1 aibody   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   AT2R1-Ab

河弧菌(VF)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)2,2'-Dithiobisbenzanilide  中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫  分子式:C26H20N2O2S2    緊張素2受體1   英文名稱:   Human Angiotensin 2 receptor Type 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   AG2

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