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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

雄激素   英文名稱：   Androgen   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ADG  Odoroside H  中文名：  分子式：C30H46O8  度：98.5%

胸腺基質(zhì)細(xì)胞生成素 (TSLP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  O-Benzyl-L-tyrosine  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3  

胸腺和活化調(diào)節(jié)趨化因子 (TARC)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Atracurium oxalate  中文名：阿曲庫(kù)胺草酸鹽  分子式：C53H68N2O16  度：98.0%

胸腺表達(dá)趨化因子 (TECK)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  O-Benzyl-L-tyrosine  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3  度：98.0%

胸腺表達(dá)化學(xué)因子 (TECK)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Atracurium oxalate  中文名：阿曲庫(kù)胺草酸鹽  分子式：C53H68N2O16
NCF2 Others Human  NCF-2 / NCF2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫代甜菜堿 12質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSulfobetaine 12,SDDAB

小氣道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)恩他卡朋;COMT抑制劑質(zhì)量規(guī)格：>99%,BREntacapone

獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4 軟組織細(xì)胞，TE 115.T細(xì)胞 Eca-109(細(xì)胞)十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade)質(zhì)量規(guī)格：>95%,Tech Grade dodecylbenzenesulfonate

小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H209硅酸鈉九水(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR silicate hydrate

CD4 Others Human  CD4 / LEU3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBluo-Gal
狗間葉干細(xì)胞(脂肪)(5×105)加替沙星Gatifloxacin質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2加替沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）Gatifloxacin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

615小鼠樹突狀細(xì)胞瘤株;DCS 小鼠軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL吉非替尼Gefitinib質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞名稱 種屬吉非替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)Gefitinib質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸吉西他濱Gemcitabine HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯  分子式：C17H23NO6    樣生長(zhǎng)因子 -2(IGF-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

5-Benzyl L-glutamate  中文名：L-谷氨酸5-芐酯  分子式：C12H15NO4    樣生長(zhǎng)因子 -1 受體 (IGF-1R)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

5-Benzyl D-glutamate  中文名：D-谷氨酸5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4    樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白 -1(IGFBP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

5-Benzoylpentanoic acid  中文名：5-苯甲?；焖?span>  分子式：C12H14O3    樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白 -2(IGFBP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

5-Benzimidazolecarboxylic acid  中文名：5-苯并咪唑甲酸  分子式：C8H6N2O2    胰蛋白酶檢測(cè)   Alkaline phosphatase (AKP) detection

蛋白膠微量回收試劑盒本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。