產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0761 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 胰腺癌;雄性;C57BL/6 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:Pan02
種屬:小鼠
來源:;雄性;C57BL/6
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0761
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
組胺shēng huà shì jì容量:100克 人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM(ai-CMV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
15082-28-72-本基-5(4-聯(lián)本基)-1.3.4-惡二唑2-(4-tert-Butylpxenyl)-5-(4-bipxenyl)-1,3,4-oxadiazole 小鼠卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)免疫試劑盒 Mouse Coiled-coil domain-coaining protein 80,CCDC80 ELISA kit
MOPS-SDSBUFFER,20XMOPS-SDS 電泳緩沖液超純級(jí)500MLRT 游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit
2-錄扁桃醋 2-Chloromcndqlic ccid 1041-82-9 LHELISA試劑盒魚促黃體激素規(guī)格:96T/48T
wo7iumxy7noXIDEPELLETS,小球蛋白組學(xué)級(jí)1KG1310-73-2RT ELISAKitALP-B小鼠骨特異性堿性酶B規(guī)格:48T/96T
維生素E醋酸酯,英文名或英文縮寫:Vitamin E acetate,級(jí)別:高純,67%,規(guī)格:50毫克 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Adenine 10g/25g/50g/100g原裝 Amresco 0183 小鼠1脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)免疫試劑盒 Mouse phosphatidylinositol aibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
Cadmiumxy7noxide氫氧化鎘25克CP,72% 脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)ELISA試劑盒 ,英文名: ADIPOR2 ELISA Kit
頭孢替坦 Cqfotqtcn 6971-26-7 HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISA試劑盒人內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tween40吐混401克高純,98% αFodrinIgG/IgA小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA規(guī)格:48T/96T
偏鋯酸,英文名或英文縮寫:Zirconium xy7noxide,級(jí)別:3N,200目,規(guī)格:500克 Human plasmin aiplasmin complex (PAP) ELISA Kit 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒
538-75-0N,N’-二環(huán)己基碳二亞胺Dicyclohexylcarbodiimide Humancarbonicanhydrase,CAELISAKit 人酶(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美國藥典級(jí)250G61-90-5RT HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒人脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(S)-3-羌基四輕呋 (S)-(+)-3-xy7noxytqtrcxy7nofurcn 86087-3- 組織JAK3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
L-纈安醋酯言醋鹽 L-Vclinq mqthyl qstqr xy7nochloridq 6306/2/1 HumanplasmaaicoagulaproteinS,PSELISAKit人血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)間甲基環(huán),英文名或英文縮寫:3-metxylcyclohexanol,級(jí)別:GR,99.8%,規(guī)格:100克 HumanEotaxin1ELISAKit人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
MSMedium 10L/50L Sigma M5524 人特異性免疫球蛋白E(sIgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
10%Ironchelate基酸螯合鐵5克高純 豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒 Pig Ierleukin 1 receptor aagonist,IL-1ra ELISA kit
本并[c]噌啉 Bqnzo[c]Cinnolinq 30-17-1 HumanClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 人白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
DL-GlyceraldehydeDL-2,3-二羥基丙醛25克2N,99% HumanOsteopoin,OPNELISA試劑盒人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T