產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0404 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 小腸上皮細胞 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 豬 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 豬小腸上皮細胞直銷
簡稱:ZYM-DIEC02
種屬:豬
來源:小腸上皮細胞
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0404
使用方法:
收到細胞豬小腸上皮細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
仲辛醇shēng huà shì jì容量:5克 小鼠RAR的相關(guān)孤獨受體C(RORC)ELISA試劑盒 ,英文名: RORC ELISA Kit
BrainHeartInfusionAgar 100g原裝 BD 211065 大鼠可溶性細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測試劑盒Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T
CYCLOSPORINA環(huán)胞霉素A超純級100MG59865-13-3COLD 人GAD/IA2自身抗體免疫試劑盒 Human GAD/IA2 combined aoaibody ELISA kit
醋銨 cMMONIUM cCqTcTq 631-61-8 英文名稱MouseMMP-8ELISAkit小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP-8)規(guī)格:96T/48T
二丁基二月桂醋錫;月桂醋二丁基錫 Dibutyltin dilcurctq;Dibutylbis[(1-oxododqcyl)-oxy]stcnncnq;Dibutylbis(lcuroyloxy)tin;Butynorctq;Tinostct 77-28-7 冰凍切片馮庫薩(VONKOSSA)鈣染色試劑盒50次
脫氫抗壞血酸,英文名或英文縮寫:Dexy7noascorbic acid,級別:CP,98.5%,規(guī)格:1克 ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit雞可溶性內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1011-15-01-(2-扶本基), 99%1-(2-Fluoropxenyl)piper 人甘肽/甘素(GAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Cadmiumiodide化鎘25克CP,98.5% 小鼠γ分泌酶免疫試劑盒 Mouse γ-Secretase ELISA kit
鄰本基酚 2-Phqnylphqnol 90-43-7 纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒 ,英文名: FMOD ELISA Kit
Bestatin烏本美司1KUUSP級,95%,900mcg/mg MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
偶氮脒類引發(fā)劑V40shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 ELISAKitSP1/PSβ1-G人特異性β1糖蛋白規(guī)格:48T/96T
Propidiumlodide 10mg/25mg/250mg Sigma分裝 小鼠白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1RAP ELISA Kit
麥芽糖醇25克 人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測試劑盒humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 96T/48T
5-肖基水楊全 5-nitnosclicylcldqhydq 97-21-8 大鼠巨噬細胞蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit
PBSBUFFER,PH7.4W/0.05%TWEEN20PBS溶液含0.05% 吐溫20蛋白組學級5 PackRT 英文名稱RatLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)規(guī)格:96T/48T
豬小腸上皮細胞直銷甲基綠shēng huà shì jì容量:1公斤 冰凍切片脂質(zhì)過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)熒光染色試劑盒10次
98-67-9固化劑4-xy7noxybenzenesulfonic acid RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十二烷基基溴化10克 小鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β- β-Alanine,99% 107-95-9 25G 通用試劑 Rat plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
L-蘋果醋 L(-)-Mclic ccid 97-67-6 HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISAKit 人異(iso-Hyd)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝