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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：NS-1

種屬：小鼠

來(lái)源：

培養(yǎng)基：IMDM

狀態(tài)：半貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0788
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
中分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白，英文名或英文縮寫：Middle range protein MW marker，級(jí)別：BR，100u/mg，規(guī)格：100克  Ratbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISA試劑盒大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

12650-88-3溶菌酶LysozyMe froM chicken egg white BioCheMika  humancolicinELISA試劑盒人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

AZUREB天青B高純級(jí)深綠色/紫色粉末RTsigma  Humanerythropoiesisstimulatingfactor,ESFELISAKit人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2--5- 2-Chloro-5-fluoro,98% 84194-30-9 5G 通用試劑  牛金屬硫蛋白(MT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

銨/铔/硫銨/硫/Ammonium sulfate AR，99% 500克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口  人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒 Human ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit
吐溫65100克  人癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit人癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit，48T/96T人癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit，48T/96T規(guī)格：48T/96T

94-75-72,4-二錄本氧基乙酸2,4-Dichloropxenoxyacetic acid  小鼠白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鹽培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克  Human dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 人脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA試劑盒

2-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8  Humanglucokinase,GCKELISAKit 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

扶化鋁鉀，英文名或英文縮寫：potewwium fluoaluminate，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：100克  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISA試劑盒人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
諾納德P40500克  細(xì)菌氧化酶定性檢測(cè)試劑盒20次

73049-73-7胰蛋白胨;胰化蛋白胨Tryptone  RabbitGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫檸膽蔗瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：500毫升  豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-高苯酸 DL-Homophenylalanine 1012-05-1 1G 通用試劑  Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒

異炳基-beta-D-流代半乳糖糖苷 IPTG,Dioxcnq-Frqq 367-93-1  HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小鼠細(xì)胞直銷甲基庚基甲酮，英文名或英文縮寫：2-Nonanone，級(jí)別：色標(biāo)，99.5%，規(guī)格：1克  CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β內(nèi)啡肽受體規(guī)格：48T/96T

AmmoniumPersulfate 50g/100g Sigma分裝  細(xì)菌鹽肉湯500毫升

3,3-Dimetxylallylbromide4-溴-2--2-丁烷25克BR  RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

膠原蛋柏 Type II(2-8°C) Collcgqns polypqptidq 9007-34-2  豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

ProteinprotectantTY蛋白保護(hù)劑TY1克生物技術(shù)級(jí)，200u/mg  Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。