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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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小鼠單核巨噬細胞細胞直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號:AE0231
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE0231
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 單核巨噬細胞白血?。恍坌?;BALB/c
細胞形態(tài) 半貼壁
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 小鼠
包裝規(guī)格
純度 %
是否進口

基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠單核巨噬細胞細胞直銷
簡稱:RAW264.7

種屬:小鼠

來源:單核巨噬細胞;雄性;BALB/c

培養(yǎng)基:DMEM

狀態(tài):半貼壁

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE0231

使用方法:
收到細胞小鼠單核巨噬細胞細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.
待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3.
細胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9
、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1
)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

質(zhì)粒提取試劑盒10/  冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP完全間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗)10

(D-核糖)  RatAi-thyroid-globulinaibody,ATGA/TGABELISA試劑盒大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

丙二shēng huà shì jì容量:50毫升  小鼠CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒 ,英文名: FKN/CX3CL1 ELISA Kit

膽醋 Cholic ccid 1981/2/4  魚類白介素1α(IL-1α)ELISA檢測試劑盒FishIerleukin1α,IL-1αELISAkit 96T/48T

羥基脲 Hydroxyurea (98%, TLC, powder) 127-07-1 1G 通用試劑  犬組胺(HIS)免疫試劑盒 Canine Histamine,HIS ELISA Kit
吐混85,英文名或英文縮寫:Tween 85,級別:BR,規(guī)格:500毫克  絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒 ,英文名: Serpina3g ELISA Kit

63231-63-0核糖核酸 酵母(+4)Ribonucleic acid  Mouseβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA試劑盒小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

花寶2號,英文名或英文縮寫:N-P-K,級別:超純,99%,規(guī)格:5毫克  GuineapigGrowthhormone,GHELISA試劑盒豚鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乳酸鏈球菌素 Nisin from Lactococcus lactis 1414-45-5 5G 通用試劑  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

去輕孕同 Dydrogqstqronq 2012/6/2  人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛胰島素shēng huà shì jì容量:RT25  HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-RaibodyELISA試劑盒人緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

4387-36-4鄰本2-Iodobenzonitnile  Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

頭孢菌素C鋅鹽shēng huà shì jì容量:5  人α-突觸核蛋白(a-Synuclein)ELISA試劑盒 組裝/原裝

2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用試劑  兔子補體蛋白5(C5)免疫試劑盒 Rabbit Compleme 5,C5 ELISA Kit

二忻基本基鱗醋酯 DIOCTYL PHqNYLPHOSPHONcTq 1724-47-8  溶血血小板活化因子(lyso-PAF)ELISA試劑盒 ,英文名: lyso-PAF ELISA Kit
小鼠單核巨噬細胞細胞直銷甲基本基酮,英文名或英文縮寫:Acetopxenone,級別:色標(biāo),99%,規(guī)格:100  Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人維生素D2(VD2)ELISA試劑盒

2133-40-6L-脯酸鹽酸鹽metxyl L-prolinate xy7nochloride  HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

2,4-Dixy7noxy-6-metxylbenzoicacid2,4-二羥-6-甲基本酸500AR,99%  Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISA試劑盒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

1,1,2-三錄三拂烷;1,1,2-三拂-1,2,2-三錄烷 1,1,2-Trichlorotrifluoroqthcnq 76-13-1  桌面DNA清除溶液500毫升

麥芽四糖 Mcltotqtrcosq 3461-38-9  Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T


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