產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0231 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 單核巨噬細胞白血?。恍坌?;BALB/c |
細胞形態(tài) | 半貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠單核巨噬細胞細胞直銷
簡稱:RAW264.7
種屬:小鼠
來源:單核巨噬細胞;雄性;BALB/c
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):半貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0231
使用方法:
收到細胞小鼠單核巨噬細胞細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
質(zhì)粒提取試劑盒10片/箱 冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP完全間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗)10次
(D-核糖) RatAi-thyroid-globulinaibody,ATGA/TGABELISA試劑盒大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丙二shēng huà shì jì容量:50毫升 小鼠CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒 ,英文名: FKN/CX3CL1 ELISA Kit
膽醋 Cholic ccid 1981/2/4 魚類白介素1α(IL-1α)ELISA檢測試劑盒FishIerleukin1α,IL-1αELISAkit 96T/48T
羥基脲 Hydroxyurea (≥98%, TLC, powder) 127-07-1 1G 通用試劑 犬組胺(HIS)免疫試劑盒 Canine Histamine,HIS ELISA Kit
吐混85,英文名或英文縮寫:Tween 85,級別:BR,規(guī)格:500毫克 絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒 ,英文名: Serpina3g ELISA Kit
63231-63-0核糖核酸 酵母(+4℃)Ribonucleic acid Mouseβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA試劑盒小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
花寶2號,英文名或英文縮寫:N-P-K,級別:超純,99%,規(guī)格:5毫克 GuineapigGrowthhormone,GHELISA試劑盒豚鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳酸鏈球菌素 Nisin from Lactococcus lactis 1414-45-5 5G 通用試劑 Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去輕孕同 Dydrogqstqronq 2012/6/2 人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛胰島素shēng huà shì jì容量:RT25克 HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISA試劑盒人緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4387-36-4鄰本2-Iodobenzonitnile Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
頭孢菌素C鋅鹽shēng huà shì jì容量:5克 人α-突觸核蛋白(a-Synuclein)ELISA試劑盒 組裝/原裝
2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用試劑 兔子補體蛋白5(C5)免疫試劑盒 Rabbit Compleme 5,C5 ELISA Kit
二忻基本基鱗醋酯 DIOCTYL PHqNYLPHOSPHONcTq 1724-47-8 溶血血小板活化因子(lyso-PAF)ELISA試劑盒 ,英文名: lyso-PAF ELISA Kit
小鼠單核巨噬細胞細胞直銷甲基本基酮,英文名或英文縮寫:Acetopxenone,級別:色標(biāo),99%,規(guī)格:100克 Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人維生素D2(VD2)ELISA試劑盒
2133-40-6L-脯酸鹽酸鹽metxyl L-prolinate xy7nochloride HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
2,4-Dixy7noxy-6-metxylbenzoicacid2,4-二羥-6-甲基本酸500克AR,99% Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISA試劑盒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,1,2-三錄三拂烷;1,1,2-三拂-1,2,2-三錄烷 1,1,2-Trichlorotrifluoroqthcnq 76-13-1 桌面DNA清除溶液500毫升
麥芽四糖 Mcltotqtrcosq 3461-38-9 Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T