產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01242 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 垂體瘤;雌性;Wistar Furth |
細胞形態(tài) | 半貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 大鼠 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 大鼠細胞特價
簡稱:GH3
種屬:大鼠
來源:;雌性;Wistar Furth
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):半貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE01242
使用方法:
收到細胞大鼠細胞特價后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
脂質(zhì)體2000shēng huà shì jì容量:250克 組織切割酶/β分泌酶(MENAPSIN2;β-SECRETASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒20次
145224-94-82-(N-嗎啉基)乙磺酸一水 (MES)MES monohydrate humanHypotheticalproteinLOC677168ELISAKit人假定蛋白LOC677168ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
eetonitnILE*NOAIRSHIPMENT*以HPLC級4L1975-5-8RT 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-錄酰安;錄酰安 2-ChloroccqtcMidqClCH2CONH2;2-ChloroqthcncMidq 1979-7- 豬性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒 Pig von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit
CHAPSOCHAPSO蛋白組學(xué)級10G82473-24-3RT Humansignalansduction-Smad1ELISAKit 人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
透鈣嶙石,英文名或英文縮寫:Calcium xy7nogenphosphate dihydrate,級別:CP,98%,規(guī)格:1克 生長分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒 ,英文名: GDF15 ELISA Kit
甲基酸甲脂NA PorcineFibrinogen,FbgELISA試劑盒豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
H酸單鈉鹽,英文名或英文縮寫:H acid monowo7ium salt,級別:BR,99%,規(guī)格:250毫克 HumanAbnormalprothrombin,APTELISA試劑盒人異常凝血酶原(APT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二氫膽固醇 Dihydrocholesterol (HPLC,≥98%) 80-97-7 20MG 標準品 Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit人抗1脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
多庫酯內(nèi) Docusctq wo7ium 277-11-7 人白介素23(IL-23)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛磺脫氧膽酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium taurodeoxycholat,級別:BR,99%,規(guī)格:5克 神經(jīng)穿透素1(NPTX-1)ELISA試劑盒 ,英文名: NPTX-1 ELISA Kit
1073-06-9間溴扶本3-Bromofluorobenzene Porcineierleukin2,IL-2ELISA試劑盒豬白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙二酸氫鉀,英文名或英文縮寫:potewwium xy7nogen oxalate,級別:AR,97%,規(guī)格:500克 HumanAlanineAminoansferase,ALT/GPTELISA試劑盒人氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,5-二羥基對苯二 2,5-Dihydroxyterephthalic acid,98% 610-92-4 5G 通用試劑 Humanapelin13,AP13ELISAKit人apelin13(AP13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-胱安醋;DL-3,3′-二流代雙(2-安基炳醋); DL-雙流代炳安醋 DL-Cystinq; 93-3-0 人ω干擾素(IFN-ω)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠細胞特價甲泛影酰,英文名或英文縮寫:Metrizamide,級別:優(yōu)質(zhì)級,規(guī)格:1毫克 豚鼠病毒表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒 ,英文名: HBsAb ELISA Kit
DL-色酸;DL-胰化蛋白基酸;DL-色基酸;DL-2-基-3-吲哚基-1-酸;DL-基吲哚酸DL-Tryptophan ;DL-2-AMino-3-indolepropionic acid;DL-2-AMino-3-indolylpro-panoic acid;DL-β-3-Indolyl alanine;(±)-2-AMino-3-(3-indolyl)propionic acid Human protein tyrosine phosphatase (PTP/PTPase/CD148) ELISA Kit 人蛋白酪氨酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒
D-GalactoseD-(+)-葡萄糖25UACS級,99% MonkeyEndothelin1,ET-1ELISAKit內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
1.3-環(huán)己二同,98% 1,3-Cyclohqxcnqdionq 204-0-9 CLIAKitforBMP-4ELISAKit大鼠骨成型蛋白4規(guī)格:48T/96T
流醋亞工 MqRCUROUS SULFcTq 7783-36-0 細菌明膠瓊脂平板50個