產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0085 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 皮膚;T淋巴瘤;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人T細(xì)胞直銷
簡稱:HuT78
種屬:人
來源:皮膚;T;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0085
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人T細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
皂土5克 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1RA ELISA Kit
(妥布拉霉素) 魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測試劑盒FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T
shēng huà shì jì容量:RT1克 人11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)免疫試劑盒 Human 11β-HSD1 ELISA kit
4-氧基酚;隊羌基本迷;輕醌單迷隊氧基本酚 4-Mqthoxyphqnol;xy7noinoneonq MonoMqthyl qtqr 120-76-2 英文名稱MouseCCL3ELISAKit小鼠CCL3規(guī)格:96T/48T
離子交換劑Ⅲshēng huà shì jì容量:100克 冰凍切片組織免疫化學(xué)固著溶液10毫升
糖元三型,英文名或英文縮寫:Glycogen from rabbit liver,級別:超純,98%,規(guī)格:5克 HumanfibrinopeptideA,FPAELISAKit人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
139177-64-3三扶磺酸鉺ERBIUM (III) TRIFLUOROmetxANESULFONATE 牛β羥(βOHB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
MINERALOIL石蠟油無色油狀液體RTsigma 人中性粒細(xì)胞抗體(ANA)免疫試劑盒 Human ai-neuophil aibody,ANA ELISA Kit
3-溴 3-Bromo,97% 3132-99-8 25G 通用試劑 化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒 ,英文名: pAMPK ELISA Kit
組胺/組胺鹽/二組織胺/Histamine diphospate BR,98% 5克 國產(chǎn)/進(jìn)口 Ratcalcineurin,CaNELISA試劑盒大鼠鈣調(diào)酶(CaN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
奈酚綠B100克 HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13446-19-0結(jié)晶高錄酸(*) PERCHLORATE HEXAHYDRATE 人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
D-MANNOSED-甘露糖高純級25G3458-28-4RT 兔子谷胱甘肽還原酶(GR)免疫試劑盒 Rabbit Glathione Reductase,GR ELISA Kit
亞甲基藍(lán) Methylene Blue hydrate,≥97.0% 122965-43-9 25G 通用試劑 殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 ,英文名: BPI ELISA Kit
二烯基本(間位和隊位混合物)(含穩(wěn)定劑基烯基本,二基本) Divinylbqnzqnq 131-74-0 Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒豬髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人T細(xì)胞直銷肌苷-5'-二嶙酸二鈉鹽,英文名或英文縮寫:5′-IDP,2Na,級別:BR,97%,規(guī)格:2000u ELISAKitE2豬雌二醇規(guī)格:48T/96T
7758-16-9焦二氫二鈉Diwo7ium pytophosphate HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISAKit人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-叔丁氧羰基-D-亮酸,英文名或英文縮寫:BOC-D-Leucine,級別:BR,98%,規(guī)格:5克 人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β-羥脫氫酶 β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase (≥20... 9028-38-0 10UN 通用試劑 小鼠組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)免疫試劑盒 Mouse histone deacetylase 1,HDAC1 ELISA kit
全-d2 FORMcLDqHYDq-D2 1664-98-8 豬病毒(PHV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。