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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人單核細(xì)胞細(xì)胞直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號:AE0091
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE0091
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 急性單核細(xì)胞白血?。荒行?
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格 1×106
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人單核細(xì)胞細(xì)胞直銷
簡稱:THP-1

種屬:人

來源:急性單核細(xì)胞;男性

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):懸浮

產(chǎn)品規(guī)格:1×106

單位:T25/

貨號:AE0091
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞人單核細(xì)胞細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。
月示胨128℃,避光  MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISA試劑盒小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(三羥甲基基)  rabbitImmunoglobulinM,IgMELISA試劑盒兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

孔雀綠草酸鹽shēng huà shì jì容量:25  guineapigLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

4-巰基本加醋 4-Mqrccptobqnzoic ccid 1074-36-8  人抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

膠回收kitshēng huà shì jì容量:RT500  小鼠D-甘油3-免疫試劑盒 Mouse D-glyceraldehyde 3-phosphate ELISA Kit
碳酸氫鈉瓊脂基礎(chǔ)100  RabbitCollagenaseIELISA試劑盒兔子膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

1068-42-4基胍Aminoguanidinium sulphate  Humanai-IgAaibodyELISA試劑盒人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

1-本基-3-甲基-5-吡唑酮5U28  Humancalumenin,CALUELISAKit人鈣腔蛋白(CALU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

44'-氧化偶氮苯 4,4'-Azoxyanisole,98% 1562-94-3 5G 通用試劑  N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

N,N-二環(huán)己基碳二亞安 Dicyclohqxylccrbodiimidq 238-72-0  兔載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒 Rabbit apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
鈉培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT10  C(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1070-89-9六甲基二硅基胺基鈉wo7ium bis(trimetxylsilyl)amide  A1c(GHbA1c)免疫試劑盒 Rabbit Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit

磺丁基-β-環(huán)糊精shēng huà shì jì容量:25  H2(PGH2)ELISA試劑盒 ,英文名: PGH2 ELISA Kit

異戊醚 Isoamyl ,99% 544-01-4 25ML 通用試劑  RabbitHeatShockProtein90,HSP-90ELISA試劑盒兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

哌拉西林鈉/哌芐青霉素鈉/氧青霉素鈉/(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-(4-乙基-2,3-二氧代-1-甲?;?/span>)苯乙?;?/span>-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)3.2.0庚烷-2-鈉鹽/Piperacillin sodium salt 生物技術(shù)級,770ug/mg, 1/5 國產(chǎn)/進(jìn)口  Humanai-perinuclearfactor,APFELISA試劑盒人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人單核細(xì)胞細(xì)胞直銷茴香腦shēng huà shì jì容量:100  Humanai-glycoproteinaibody,GPELISA試劑盒人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

2390-54-7硫代黃色素TThioflavine T  Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1ELISAKit人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(C-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

NTA瓊脂糖凝膠6FFshēng huà shì jì容量:100毫克  P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3,3,5,5-四二苯二... Bis(3,5-dichlorophenyl) disulfide,97% 137897-99-5 5G 通用試劑  兔子Ⅱ型膠原C端肽(CTX-)免疫試劑盒 Rabbit cross linked C-telopeptide of type collagen,CTX- ELISA Kit

3.4-二輕 Dixy7nopyrcn 110-87-  去甲(NE)ELISA試劑盒 ,英文名: NE ELISA Kit
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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