產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0787 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 骨髓瘤;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞人細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人細(xì)胞直銷
簡稱:OPM-2
種屬:人
來源:;女性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0787
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
遠(yuǎn)藤氏瓊脂培養(yǎng)基250克RT 小鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4595-60-22-溴嘧啶2-Bromopyrimidine Human pepsinogen A (PG-A) ELISA Kit 人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒
磺胺嘧啶鈉shēng huà shì jì容量:100克 HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit 人超敏特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
2.3-二安基97% 2,3-DIcMINOncphclqnq 771-97-1 Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISA試劑盒人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蘇丹Ⅳshēng huà shì jì容量:250毫克 組織CDK5/P35激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
碳酸氫1克 Humanbacterialvaginosis,BVELISAKit人細(xì)菌(BV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
610-97-92-本metxyl 2-iodobenzoate 人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胰凝乳蛋白酶(牛)1克2~8℃,避光 兔子補體片斷3a(C3a)免疫試劑盒 Rabbit Compleme fragme 3a,C3a ELISA Kit
2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用試劑 肉毒堿O-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(CRAT/CAT1)ELISA試劑盒 ,英文名: CRAT/CAT1 ELISA Kit
香葉木速 DiosMqtin 20-34-3 PorcineSomatostatin,SSELISA試劑盒豬生長抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鈉測試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))10個RT 小鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(dNTP混合物) Rat pepsin (Pepsin) ELISA Kit 大鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒
草酸鎳shēng huà shì jì容量:30毫升 Humancatecholamine,CAELISAKit 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
霍亂讀速B亞基 (2-8℃) CHOLqRc TOXIN B SUBUNIT 131096-89-4 HumanCompleme1q,C1qELISA試劑盒人補體1q(C1q)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
代乙酰胺 (生物級) Iodoacetamide (BioUltra, ≥99%) 144-48-9 5G 通用試劑 組織a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量檢測試劑盒20次
人細(xì)胞直銷磺基水楊酸鈉shēng huà shì jì容量:2~8℃5克 套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒 ,英文名: iNV ELISA Kit
D+Galactose 25g/50g Amresco分裝 MouseskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISA試劑盒小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
原色硅膠2KU2~8℃ ChickenLipopolysaccharides,LPSELISA試劑盒雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
環(huán)炳沙星 Ciprofloxccin 8271-33-1 HumanactivatedproteinC,APCELISAKit人活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
溴化銅 Cupric bromidq 7789-42-9 人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。