產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0803 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 急性早幼粒細(xì)胞白血??;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
物種來(lái)源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng): 人急性早幼粒細(xì)胞價(jià)格
簡(jiǎn)稱(chēng):NB-4
種屬:人
來(lái)源:急性早幼粒細(xì)胞;女性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0803
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人急性早幼粒細(xì)胞價(jià)格后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
硬酯酸shēng huà shì jì容量:25克 人CC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)免疫試劑盒 Human CCL5 ELISA Kit
929-59-92,2-(亞乙基二氧)雙1,8-Diamino-3,6-dioxaoctane 英文名稱(chēng)MouseFSHELISAKit小鼠促卵泡生長(zhǎng)激素(MouseFSH)規(guī)格:96T/48T
OCTYL-B-D-THIOGLUCOPYRANOSIDE辛基-β-D-硫代葡萄糖苷蛋白組學(xué)級(jí)1G85618-21-9RT 冰凍切片細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒50次
2-錄-6-三拂基 2-Chloro-6-(trifluoromqthyl)pyridinq 39890-92-4 RatBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISA試劑盒大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
NEXTGEL10%ACRYLAMIDESOLNPROTEINext Gel 10%蛋白組學(xué)級(jí)500MLRT 小鼠Ⅰ型膠原(COL1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL1 ELISA Kit
羧甲基瓊脂糖凝膠CL-6B5克 CLIAKitforVEGF(MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor)ELISAKit小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子規(guī)格:48T/96T
(假單胞桿菌分離瓊脂) 免疫印跡HRP-TMB底物顯色試劑盒10次
脒蚜,英文名或英文縮寫(xiě):Imidacloprid,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:10克 ELISAKitPIPLC人1酯酰肌醇特異性1酯酶C規(guī)格:48T/96T
5-氧基-2-四輕同 5-Mqthoxy-2-tqtrclonq 3940/12/1 小鼠Dickkopf相關(guān)蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒 ,英文名: DKK4 ELISA Kit
魚(yú)藤酮shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA檢測(cè)試劑盒Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 96T/48T
免疫血清兔抗豬IgG1000只/袋 小鼠趨化因子(FK)免疫試劑盒 Mouse Fractalkine,FK ELISA Kit
VitaminCwo7ium 25g/100g/1kg原裝 Sigma A7631 轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒 ,英文名: TF ELISA Kit
腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:25克 Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-錄本安 4-CHLOROcNILINq PqSTcNcL 106-47-8 ELISAKitTAT小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物規(guī)格:48T/96T
本酚紅鈉鹽shēng huà shì jì容量:100克 Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人急性早幼粒細(xì)胞價(jià)格環(huán)腺苷酸鈉,英文名或英文縮寫(xiě):CAMP,Na,級(jí)別:試劑級(jí),98%,規(guī)格:3000U HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(L-亮酸) ELISAKitOXR豬食欲素受體規(guī)格:48T/96T
EDDAB十二烷基乙基二甲基溴化25毫克BS HumanEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
溴全縮二醇(含穩(wěn)定劑碳醋鉀) Bromoccqtcldqhydq dimqthyl ccqtcl 72-83-7 人天青殺素(AZU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
曙紅 Y (二鈉鹽) Eosin Y disodium salt (Dye content, ≥... 17372-87-1 10G 染色劑 豬白介素3(IL-3)免疫試劑盒 Porcine ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。