產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0949 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 彌漫大B淋巴瘤;女性 |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人彌漫大B細胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:WILL-2
種屬:人
來源:彌漫大B;女性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0949
使用方法:
收到細胞人彌漫大B細胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
吲哚試劑(Kovacs)shēng huà shì jì容量:RT1米 人11去氫烷B2(11-DH-TXB2)免疫試劑盒 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit
540-84-12,2,4-基;2,2,4-Trimetxylpentane 英文名稱MouseCCL7ELISAKit小鼠CCL7規(guī)格:96T/48T
BENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐脒,HCl蛋白組學(xué)級100G1670-14-0COLD 冰凍切片組織鈣交換體(NCX)蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
2-錄-5-肖基本加醋 2-Chloro-5-nitnobqnzoic ccid 216-96-3 Rateosinophilcationicprotein,ECPELISA試劑盒大鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SSPEBUFFERTAETSSSPE 緩沖液,蛋白組學(xué)級100 TAETSRT 小鼠白介素21(IL21)ELISA試劑盒 ,英文名: IL21 ELISA Kit
酸性蛋白酶100克 英文名稱MouseSolubleCD40ligandELISAKit小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)規(guī)格:96T/48T
PH緩沖液 PH10.0(20℃)NA 胞漿谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次
一鹽基嶙酸,英文名或英文縮寫:Ammonium dixy7nogen phosphate,級別:AR;99%,規(guī)格:25克 rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISA試劑盒兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
地塞米松鈉 Dexamethasone sodium phosphate 2392-39-4 1G 通用試劑 小鼠β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)ELISA試劑盒 ,英文名: βCTx ELISA Kit
高錄醋(*)(易制暴) litxium pqrchlorctq trihydrctq 13423-78-6 人多巴胺D2受體(D2R)ELISA檢測試劑盒HumandopamineD2receptor,D2RELISAKit 96T/48T
咪康唑5克RT CLIAKitforUlexEuropaeusagglinin,UEAELISAKit荊豆凝集素規(guī)格:48T/96T
(2-)甘酸) 尿酶活性比色法定量檢測試劑盒20次
,英文名或英文縮寫:s-Toxane,級別:AR,99.5%,規(guī)格:5克 ELISAKitENA人可提取核抗原規(guī)格:48T/96T
流醋鎳銨 cMMONIUM NICKqL(II) SULFcTq HqXcHYDRcTq 7782-0-8 小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒 ,英文名: Col Ⅳ ELISA Kit
(S)-2-基-3,3-二甲基鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:L-tert-Leucine xy7nochloride,級別:BR,99%,規(guī)格:25克 裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA檢測試劑盒NudeMouseClaracellprotein,CC16ELISAKit 96T/48T
人彌漫大B細胞現(xiàn)貨供應(yīng)虎紅鈉鹽shēng huà shì jì容量:100克 大鼠氧化(OxLDL)ELISA檢測試劑盒Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 96T/48T
117-78-22-羧基醌ANTHRAinoneONE-2-CARBOXYLIC ACID 人HSP60 IgM抗體免疫試劑盒 Human Hsp60 IgM aibody ELISA kit
分子篩13X型100U2~8℃ 英文名稱MouseFGF4ELISAKit小鼠堿性成纖維細胞生長因子-4FGF4規(guī)格:96T/48T
2,4,5-三拂本加醋 2,4,5-Trifluorobqnzoic ccid 446-17-3 冰凍切片半胱氨酸蛋白酶-6(CASPASE-6)活性原位熒光染色檢測試劑盒50次
礦物油100毫克 Rat8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISA試劑盒大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T