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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人套細胞直銷
簡稱：Mino

種屬：人

來源：套細胞；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0462

使用方法：
收到細胞人套細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

異丙基-β-D-硫代半乳糖苷5克RT  HumanapoproteinA5，apo-A5ELISAKit人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

堿性酶(-20℃)NA  人γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-ISOLEUCINEL-異亮酸美國藥典級100G73-32-5RT  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)免疫試劑盒 Rabbit Maix Metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA Kit

3-羥基-9,10-二甲氧... 3-hydroxy-9,10- dimethoxypterocarpan (... 73340-41-7 10MG 通用試劑  上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒 ，英文名： ESA ELISA Kit

兒茶速 DL-CcTqCHIN 88191-48-4  PorcineKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISA試劑盒豬角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
蘇木素，英文名或英文縮寫：Hematoxylin，級別：超純，98%，規(guī)格：10克  Ratbrainnaiureticpeptide,BNPELISA試劑盒大鼠腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

12027-38-2硅鎢酸(陰涼)SILICOTUNGSTIC ACID HYDRATE  小鼠6酮素(6-K-PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

熒光素酶(細菌)，英文名或英文縮寫：Luciferase from Bacteria，級別：精制級，40u/mg，規(guī)格：5克  Rat cytochrome P450 (CYP450) ELISA Kit 大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒

三鈉鹽三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用試劑  Human8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 人8異素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

拂橡膠 III Fluoro gum III  HumanComplemefragme3b,C3bELISA試劑盒人補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基100克  組織抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20次

59227-89-3氮酮Laurocapram  Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚乙二醇300shēng huà shì jì容量：5克  人抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

褪素 Melatonin,≥98% 73-31-4 250MG 通用試劑  Human ansforming growth factor beta 2 (TGF beta 2) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒

錄化典 Iodinq monochloridq 7790-99-0  HumanDickkopf1,DKK1ELISAKit 人Dickkopf1(DKK1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
人套細胞直銷合成酶測試盒[測總NOS(T-NOS)]shēng huà shì jì容量：RT500支/包  Humanai-ribonucleoproteinAibody,RNP-AbELISAKit 人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

(大豆蛋白胨)  HumanL-LactateDehydrogenase,L-LDHELISA試劑盒人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

READYLADDER50BPDNAMARKER#N/A100RXNFROZEN  組織三肌醇(IP3)含量FR定量檢測試劑盒20次

錄化鋇;二水合錄化鋇 BctiuM chloridq dihydrctq 10361-37-  HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit人組織蛋白去乙?；?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

EDTA,0.5MSTERILESOLUTIONEDTA, 0.5M無菌溶液, pH8.0生物技術(shù)級100MLRT  人素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝