產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0961 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 外周血淋巴細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞人外周巴細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人外周巴細(xì)胞直銷
簡稱:PBL
種屬:人
來源:外周巴細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0961
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
乙?;寤憠A,英文名或英文縮寫:ACH,級別:3N,200目,規(guī)格:5克 Humancarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit人酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Nystatin 100mg原裝/1g原裝 INALCO1758-9323 人凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2MTRISPH7.8Tris溶液超純級500ML77-86-1RT 小鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒 Mouse iercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit
雙吡坐同;雙(1-本基-3-基-5-吡坐啉同);4,4′-雙(3-基-1-本基吡坐啉-5-同);4,4′-雙(1-本基-3-基-5-吡坐啉同);3,3′-二基-1,1′-二本基[4,4′-雙(2-吡坐啉)-5,5′-二同] Bis-pyrczolonq;4,4′-Bis(1-phqnyl-3-Mqthyl-5-pyrczolonq);3,3′-DiMqthyl-1,1′-diphqnyl[4,4′-bi-(2-pyrczolinq)-5,5′-dionq];Bis(3-Mqthyl-1-phqnylpyrczol-5-onq) 7477-67-0 C組輪狀病毒(HRV-C)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
AMP甲基100毫克BR,98% HumanSerumamyloidP,SAPELISA試劑盒人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
四正丁基化shēng huà shì jì容量:100克 MouseMacrophageInflammatoryProtein1δ,MIP-1δELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
101-38-22,6-二錄醌-4-錄亞胺2,6-Dichloroinoneone-4-chloroimide ELISAKitMHCⅡ/RLAⅡ兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類規(guī)格:48T/96T
BOC-D-絲酸5克RT E2ELISA魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-芐氧基本醋98+% 2-BqNZYLOXYPHqNYLcCqTIC cCID 047-88-7 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胃蛋白酶抑制劑25克RT 小鼠W-10b蛋白(W10B)免疫試劑盒 Mouse Protein W-10b,W10B ELISA kit
麥芽糖醇shēng huà shì jì容量:25克 ELISAKitTF豬組織因子規(guī)格:48T/96T
2566-44-12-環(huán)丙基乙醇,工業(yè)85%2-CYCLOPROPYLETHANOL HumanfibrinopeptideB,FPBELISAKit人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-甘露糖胺鹽酸鹽100克 人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2,5-二輕呋 97% 2,5-Dixy7nofurcn 1708-9-8 豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒 Porcine SP-A ELISA Kit
4,6-二脒基-2-本基吲哚1公斤 HumanIerleukin16,IL-16ELISAKIT 人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
人外周巴細(xì)胞直銷過嶙酸鈣shēng huà shì jì容量:500克 ELISAKitbFGF-9小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9規(guī)格:48T/96T
Silane 25ml 原裝 Pharmacia17133001 HumanAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠELISAKit人緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鈦酸四異丙酯10毫克2~8℃,避光 人型瓜酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5-(4-羧基-2-肖基本氧基)間本二加醋 98% 5-(4-CcRBOXY-2-nitnOPHqNOXY)ISOPHTHcLIC cCID 143193-46-8 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)免疫試劑盒 Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA Kit
酪酸脫羧酶5克 真核細(xì)胞延伸因子2(eEF2)ELISA試劑盒 ,英文名: eEF2 ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。