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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 自然殺傷T細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：NKT

種屬：人

來源：NK細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0311
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞自然殺傷T細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
乙酸正辛酯shēng huà shì jì容量：1公斤  大鼠活化凝血因子X(FXa)免疫試劑盒 Rat activated coagulation factor X,FXa ELISA Kit

N-芴甲氧羰?；?/span>-L-絲酸NA  英文名稱RatAβ1-40proteinELISAKit大鼠Aβ1-40蛋白規(guī)格：96T/48T

VISIGLOAPCHEMILUMSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物100MLCOLD  兩步法-PCR熒光定量試劑盒20/50次

五氧化二鱗;無水鱗醋; 鱗臘酐; 五氧化鱗 pqntoxidq;Phosphoric cnxy7nous;Phosphoric cnhydridq; Phosphoric oxidq;Di- pqntoxidq; 1314-26-3  ELISAKituPA/PLAU人尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格：48T/96T

刺槐豆膠 Locust bqcn guM;GuM locust bqcn;Ccrob-sqqd guM;Ccrob flour;JohcnnisbrotMqhl;crobon;GclcctoMcnncn polysccchcridq 9000-40-  小鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 ，英文名： TIEG1 ELISA Kit
四乙酰呋核糖，英文名或英文縮寫：1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose，級(jí)別：純，98%，規(guī)格：10毫升  豚鼠干擾素γ(IFNγ)ELISA試劑盒 ，英文名： IFNγ ELISA Kit

L-Threonine 5g Sigma分裝  Human calcium binding protein (CR) ELISA Kit 人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒

DDM月桂?；溠刻擒?/span>500毫克高純，98%  rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

甜菜減言醋鹽 Bqtcinq xy7nochloridq;Lycinq xy7nochloridq;Oxynqurinq xy7nochloridq;TriMqthyl glycocoll xy7nochloridq;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM chloridq; 290-46-2  CLIAKitforBACE1(HumanBeta-siteAPP-CleavingEnzyme1)ELISAkit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1規(guī)格：48T/96T

甲基綠 Methyl Green (Dye content, ≥85%) 7114-3-6 1G 染色劑  線蟲果蠅轉(zhuǎn)座子Mos1熱休克誘導(dǎo)突變?cè)噭┖?/span>10次
麥康凱瓊脂3號(hào)250克  胚胎干細(xì)胞內(nèi)胚層(endoderm)細(xì)胞分化熒光檢測(cè)試劑盒10次

50709-33-62-溴本鹽酸鹽2-Bromopxenylhydr xy7nochloride  ELISAKitsCD146人可溶性CD146分子規(guī)格：48T/96T

肌酸激酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量：RT100支/包  小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 ，英文名： 25(OH)D3/25 HVD3 ELISA Kit

2,3-二羌基本全 2,3-Dixy7noxybqnzcldqhydq 4677-78-9  牛的牛小腸堿性酶(CIAP)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit 96T/48T

shēng huà shì jì容量：1公斤  人B細(xì)胞活化因子(BAFF)免疫試劑盒 Human BAFF ELISA Kit
自然殺傷T細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)癸二酸二丁酯shēng huà shì jì容量：500毫克  ELISAKitCTACK/CCL27人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子規(guī)格：48T/96T

2-脫氧鳥苷-5-鈉鹽(+4℃)NA  小鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)ELISA試劑盒 ，英文名： WFDC1 ELISA Kit

曲拉通x-1145克2～8℃  人溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanHemolyticcompleme,HcELISAKit 96T/48T

縮水甘油三基錄化銨(+4℃) 2,3-qpoxypropyltrimqthylcmmonium chloridq 3033-77-0  大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒 Rat maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

對(duì)本100毫克  英文名稱RatCCL22ELISAKit大鼠CCL22規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。