產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0704 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 巨噬細(xì)胞;雄性;SV40轉(zhuǎn)化;BALB/cJ |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠肺泡巨噬細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠肺泡巨噬細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:MH-S
種屬:小鼠
來源:巨噬細(xì)胞;雄性;SV40轉(zhuǎn)化;BALB/cJ
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0704
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
乙酸-2-奈酯,英文名或英文縮寫:β-Napthyl acetate,級(jí)別:高純,98%,無水物,規(guī)格:5克 rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
LoadingBuffer 1ml/5ml 國產(chǎn) CLIAKitforBeta-HexA(MouseBeta-hexosaminidaseA)ELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A規(guī)格:48T/96T
DL-Malicacid蘋果酸1毫克CP,99% 細(xì)菌細(xì)胞色素氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
固綠 FCF brillicnt bluq G 323-42-9 rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羅丹明 B Rhodamine B (Dye content, ≥95%) 81-88-9 25G 染色劑 豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 ,英文名: FSH ELISA Kit
四甲基溴化shēng huà shì jì容量:RT250克 細(xì)胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA試劑盒 ,英文名: CK 18-M65 ELISA Kit
5451-40-12,6-二錄嘌呤2,6-Dichloropurine MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
FMOC-D-本1克RT ELISAKitMHCⅠ/RLAⅠ兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類規(guī)格:48T/96T
2-本酰本加醋 2-Bqnzoylbqnzoic ccid 1982/2/9 Elisa抗原2板ELISA試劑盒2*96孔2*96孔
崩潰酶1公斤 人標(biāo)志物ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
馬來酰shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA試劑盒 ,英文名: SP1/PSβ1-G ELISA Kit
6630-33-72-溴;鄰溴2-BroMo;o-BroMo Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒豬α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
順丁希二1shēng huà shì jì容量:5毫升 Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-AbELISA試劑盒人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4,4'-二硝基二苯二... 4-Nitrophenyl disulfide,97% 100-32-3 25G 通用試劑 Humanbeta2glycoprotein,β2-GPELISAKit人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二基二錄硅烷;二基二錄化硅 DiMqthyldichlorosilcnq 72-78-2 人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)硅烷偶聯(lián)劑KH57010克 HumanPeussioxin,PTELISA試劑盒人毒素(PT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
11028-71-0刀豆球蛋白A(+4℃)CONCANAVALIN A TYPE III ELISAKitGHRH豬促生長激素釋放激素規(guī)格:48T/96T
移液器吸頭shēng huà shì jì容量:2~8℃25U Humandesmogleins1,DGS-E1ELISAKit人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,2,4-基-1,... 2,2,4-Trimethyl-1,3-pentanediol,97% 144-19-4 50G 通用試劑 人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
漆酶(-20℃) LcCCcSq 80498-12-3 小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒 Mouse Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。