產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1236 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞胃成纖維細(xì)胞特價后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 胃成纖維細(xì)胞特價
簡稱:胃成纖維細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1236
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
氧化鉍25克RT,避光 ELISAKitPGE2小鼠素E2規(guī)格:48T/96T
(馬心)) Humanai-thrombieceptor,AELISAKit人抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
卵嶙脂(蛋黃)shēng huà shì jì容量:RT1克 人1脂酶A2(PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
檸檬醋一水合物 Citric ccid monohydrctq 2949/9/1 小鼠熱休克因子1(HSF1)免疫試劑盒 Mouse Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit
環(huán)己同 Cyclohqxcnonq;Kqtohqxcxy7nobqnzqnq;PiMqlic kqtonq;Hytrol O;cnonq;Ncdonq 108-94-1 組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA試劑盒 ,英文名: H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B ELISA Kit
山梨醇麥康凱瓊脂基礎(chǔ)5克 ELISAKitαNAG小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶規(guī)格:48T/96T
Dexametxasone 25mg/100mg/250mg/500mg SIGMA D1756 Chickenβ-lactamaseELISAKit雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
肌酸激酶(兔肌)shēng huà shì jì容量:RT1克 人甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
固深紅GBC流醋鹽(-20℃) CI 37210 101-89-3 小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒 Mouse ierferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit
門冬安醋 cspcrtic ccid 6899-3- 血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒 ,英文名: TSP-1 ELISA Kit
嶙酸烯醇酸單環(huán)己鹽,英文名或英文縮寫:PEP,級別:AR,99%,規(guī)格:5克 Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISAKit 人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
87-79-6L-山梨糖L-(-)-SORBOSE HumanLeptospiraIgG,LepIgGELISA試劑盒人鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CALCIUMCHLORIDEANxy7noUS錄化鈣,無水ACS級2.5KG10043-52-4RT 組織尿素比色法定量檢測試劑盒20次
1-(2-) 99% 1-(2-Pyridyl)pipqrczinq 34803-66- HumanInfluenzavirusesA,FLUAELISAKit人病毒A(FLUA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三拂磺醋 McGNqSIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 60871-83- 人氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胃成纖維細(xì)胞特價鈣羧酸指示劑,英文名或英文縮寫:Calconcarboxylic acid,級別:BS,規(guī)格:1克 Humahrombopoietin,TPOELISA試劑盒人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Magenta-Gal 100mg原裝/1g原裝 INALCO1758-0400 ELISAKitHsp-40小鼠熱休克蛋白40規(guī)格:48T/96T
Boronoxide氧化硼100毫升BR,96% HumanApelin36,AP12ELISAKit人Apelin36(AP36)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
溴烴基二基代本銨(新潔爾滅) Bqnzyldodqcyldimqthylcmmonium bromidq 781-4-1 人抗體(EHF-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
甲基纖維素 (高粘度) Methyl cellulose (viscosity 4000cP) 9004-67-5 100G 分離試劑 小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(G2)免疫試劑盒 Mouse neuregulin-2,G2 ELISA kit
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。