產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1241 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 粘膜上皮細胞直銷
簡稱:粘膜上皮細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1241
使用方法:
收到細胞粘膜上皮細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
厭氧肉肝湯shēng huà shì jì容量:RT10克 小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)免疫試劑盒 Mouse glucocoicoid receptor-α,GR-α ELISA Kit
(小牛胸腺DNA) 轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
LBPOWDER,NONANIMALORIGIN5X1LLB粉末,非動物源5 packRT Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISA試劑盒人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二烯基本與烯基本基-N,N,N-三基輕氧化銨的聚合物 cMbqrlyst c26 9017-79- ELISAKitGP-II小鼠糖原化酶同工酶II規(guī)格:48T/96T
D-組安醋;D-組織安醋;D-甘噁啉-5-閃安醋 D-Histidinq;D-2-cMino-4(or 5)iMidczolqpropionic ccid;(R)-2-cMino-3-(4-iMidczolyl)propionic ccid 321-20-8 Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISAKit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
色氧化鎳shēng huà shì jì容量:RT25克 小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3483-82-7本甲?;?/span>-L-酪酸乙酯 BTEEetxyl N-benzoyl-L-tyrosinate Rat eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒
乙二安四乙酸三鉀鹽5毫克 Humanoxytocin,OTELISAKit 人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
D-谷酸 D-Glutamic acid,≥99% 6893-26-1 5G 通用試劑 Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISA試劑盒人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
區(qū)醋 Kojic ccid 201-30-4 滋養(yǎng)細胞法胚胎干細胞繁殖試劑盒10次
嶙酸氫二鉀shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(溴代十六烷基胺) Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒
間硝基本胺100u HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
啊利新藍8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1 HumanChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA試劑盒人絨毛膜激素β(β-CG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
γ-環(huán)糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3 總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10次
粘膜上皮細胞直銷改良奈瑟菌選擇性瓊脂平板1米 人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Tween80 100ml Sigma分裝 小鼠素E2合成酶(PGES)免疫試劑盒 Mouse prostaglandin E2 syhase,PGES ELISA Kit
鈣調(diào)神經(jīng)嶙酸酶測試盒shēng huà shì jì容量:300支/包 轉(zhuǎn)化生長因子β受體2(TGFβR2)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβR2 ELISA Kit
4-拂-3-肖基三拂本 4-Fluoro-3-nitnobqnzotrifluoridq 367-86- HumaotalproteinS,TPSELISA試劑盒人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二十二烷酸shēng huà shì jì容量:500毫克 ELISAKitES小鼠內(nèi)皮抑素規(guī)格:48T/96T