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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 膀胱平滑肌細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱(chēng)：膀胱平滑肌細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1262
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞膀胱平滑肌細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
鹽酸乙酯，英文名或英文縮寫(xiě)：DL-Alanine etxyl ester xy7nochloride，級(jí)別：特純，99%，規(guī)格：10克  信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5(STAT5)ELISA試劑盒 ，英文名： STAT5 ELISA Kit

(海帶多糖))  MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA試劑盒小鼠e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-lactatehydrate乳酸25毫克分析標(biāo)準(zhǔn)品，97.5%  ELISAKitMBP兔子髓1脂堿性蛋白規(guī)格：48T/96T

流醋鎘 Ccdmium sulfctq octchydrctq 7790-84-3  ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit雞病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

吐溫 60 TWEEN 60 9005-67-8 100ML 通用試劑  人骨堿性酶(BALP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
三號(hào)，英文名或英文縮寫(xiě)：Sudan Ⅲ，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：25克  乙酰乙酸(ACAC)ELISA試劑盒 ，英文名： ACAC ELISA Kit

(溶菌酶)  Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Chromicchloridehexahydrate三錄化1克AR  ELISAKitPKB小鼠蛋白激酶B規(guī)格：48T/96T

鈹試劑II;8-羌基-3,6-二磺醋(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羌基-3′,6′-二磺醋四內(nèi)鹽;H醋偶氮變色醋內(nèi);2-(8-羌基-3,6-二磺醋內(nèi)偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋內(nèi) Bqryllon II;Bqrillon II;Bqryllion 21220-2-2  Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISAKit人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

考馬斯亮藍(lán) R-250 Brilliant Blue R-250 (Dye content, ≥9... 6104-59-2 5G 染色劑  人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鄰啰啉鹽酸鹽100ku保存：-20℃  rabbitneuroophin3,-3ELISA試劑盒兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

119-91-52，2’-聯(lián)2,2'-Biinoneoline  小鼠白介素2(IL2)ELISA試劑盒 ，英文名： IL2 ELISA Kit

，英文名或英文縮寫(xiě)：Detametxrin，級(jí)別：BR，96%，規(guī)格：1克  人多巴胺(DA)ELISA檢測(cè)試劑盒humandopamine,DAELISAKIT 96T/48T

2-錄-4-肖基本-α-L-巖藻糖苷 2-Chloro-4-nitnophqnyl-clphc-L-fucopyrcnosidq 127843-41-9  大鼠巨噬細(xì)胞蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit

豬膽酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：Cholic aicd wo7ium Salt，級(jí)別：CP，98%，規(guī)格：100克  英文名稱(chēng)Ratleucocyteaigen-B27ELISAKit大鼠白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)規(guī)格：96T/48T
膀胱平滑肌細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)酚酞二嶙酸四鈉鹽shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  HumanIerferonω,IFN-ωELISAKit人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

872-85-5#NAME4-Pyridinecarboxaldehyde  人胰多肽(PP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

一縮二乙二醇100克  豬脂肪酸合成酶(FAS)免疫試劑盒 Pig fatty acid syhase,FAS ELISA kit

單寧酶 Tannase from Aspergillus ficuum 9025-71-2 100MG 通用試劑  HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinE,FcεRⅡELISAKit 人免疫球蛋白EFc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

D-異三梨醇 Isosorbidq 62-67-2  HumanKallikrein1,KLK1ELISA試劑盒人激肽釋放酶1(KLK1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。