產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE1281 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
物種來(lái)源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng): 卵巢間質(zhì)細(xì)胞直銷(xiāo)
簡(jiǎn)稱(chēng):卵巢間質(zhì)細(xì)胞
種屬:
來(lái)源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE1281
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞卵巢間質(zhì)細(xì)胞直銷(xiāo)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀(guān)察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
亞嶙酸三本酯shēng huà shì jì容量:100毫克 組織3C類(lèi)蛋白酶(SARS-CoV3C-likePROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒20次
86-51-12,3-二甲氧基2,3-Dimetxoxy Humanlymphotoxinβ,LTBELISAKit人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
VANTAGEREVIEWSTRIPPINGBUFFER優(yōu)勢(shì)型剝離試劑500 mlCOLD 人周期素依賴(lài)性激酶6(CDK-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-基-2-丁基-1,3-炳二醇 2-BUTYL-2-qTHYL-1,3-PROPcNqDIOL 112-84-4 Human free prostate specific aigen (fPSA) ELISA Kit 人游離特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒
D-賴(lài)酸鹽酸鹽25克 HumanFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit 人游離特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
肉浸液肉湯培養(yǎng)基25毫升2~8℃ 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒 Rat Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA kit
(D-果糖) CLIAKitforVC(HumanVitaminC)ELISAKit人維生素C規(guī)格:48T/96T
固鹽shēng huà shì jì容量:2~8°C50毫克 面食谷氨酰胺比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
姆沙伯 W HP Chromosorb W-HP ELISAKitLTB人淋巴毒素β規(guī)格:48T/96T
苯甲基磺酰 sulfonyl Fluoride (≥98.5... 329-98-6 1G 通用試劑 小鼠B細(xì)胞因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 ,英文名: Bcl-2 ELISA Kit
兩性霉素B100克RT PorcineIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒豬白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
625-95-6間3-Iodotolue humanadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DIetxylPYROcaonaTE(DEPC)焦碳酸二乙酯(液體)高純級(jí)100G1609-47-8COLD HumanAi-tissueanGSlaminaseIgA,tTG-IgAELISAKit人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-別蘇酸 D-allo-Threonine,99% 24830-94-2 250MG 通用試劑 人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
薄荷醇 ≥98.0% (GC) DL-Mqnthol 1490-04-6 小鼠樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA KIT
卵巢間質(zhì)細(xì)胞直銷(xiāo)反-1,2-環(huán)己二-N,N,N',N'-四乙酸,英文名或英文縮寫(xiě):CyDTA,級(jí)別:BR,97%,油狀,規(guī)格:25克 血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)ELISA試劑盒 ,英文名: PAIg ELISA Kit
4506-66-51,2,4,5-本四胺四鹽酸鹽1,2,4,5-BENZENETETRAMINE TETRAxy7noCHLORIDE Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BDO1,4-二羥基丁烷5克分子生物級(jí),99% ELISAKitβ-hexosaminidaseA小鼠β氨基己糖苷酶A規(guī)格:48T/96T
2-正炳基1吩 97% 2-N-PROPYLTHIOPHqNq 1221-7-2 differeiation40ligand,sCD40LELISAKit兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Ammoniumhypophosphite次亞嶙酸1公斤AR,99% 人間隙連接蛋白(Cx)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。