產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P64493 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
豬源性成分PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64493 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FASN vibo-Quercitol 中文名: 分子式:C6H12O5 度:%
脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FASN vibo-Quercitol 中文名: 分子式:C6H12O5
脂肪酶測(cè)試盒 Lipase test kit Valsartan methyl ester 137863-17-3 中文名: 分子式:C25H31N5O3
脂肪酶(LPS)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 Vilazodone 中文名:鹽酸維拉唑酮 分子式:C26H28ClN5O2 度:98.0%
脂肪酶(LPS)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 α-Tocopherolquinone 中文名: 分子式:C29H50O3
白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCF硫酸核糖霉素質(zhì)量規(guī)格:≥630μg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Ribostamycin Sulfate
DDR2 Others Human DDR2 Kinase / CD167b 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 利福布丁質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRRifabutin
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞(傣族);KM9403堿式乙酸鋁(>50%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>50%,BRAluminum acetate, basic
CD59 Others Rat 大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氟化鋁三水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAluminum fluoride trihydrate
頸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL酸性氧化鋁(>90%,BC)質(zhì)量規(guī)格:Al2O3>90%,BCAluminum
oxide, active
結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT 116 [HCT116]二甲基亞砜(農(nóng)殘級(jí))Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級(jí)
REG1A Others Human REG1A / PSPS 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 十二烷基三甲基氯化銨(DTAC)(99%,離子對(duì)色譜級(jí))Dodecyltrimethylammonium chloride質(zhì)量規(guī)格:99%,離子對(duì)色譜級(jí)
腦微內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHBMEC NA二十酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC))Methyl Arachidate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)
KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 聚酰胺粉(柱層析用)Polyamide質(zhì)量規(guī)格:柱層析用
大鼠細(xì)胞;RH-35聚酰胺粉(柱層析用,200-400目)Polyamide質(zhì)量規(guī)格:柱層析用,200-400目
Cryptotanshinone
中文名:隱丹參酮 分子式:C19H20O3 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISAKit ELISA.
96T/48T
Cryptanoside A 中文名: 分子式:C30H42O10 豬調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Creoside III 中文名: 分子式:C18H24O9 豬血清(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Crenulatin 中文名:大花紅天素 分子式:C11H20O6 豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Coumarin 7 中文名: 7 分子式:C20H19N3O2 豬性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬源性成分PCR試劑盒本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。