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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Ethyl 3,5-di-O-caffeoylquinate  中文名：3,5-二咖啡?？鼘幩嵋阴?span>  分子式：C27H28O12  度：98.0%

小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  中文名：  分子式：C18H20N4O5  度：98.0%

小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子-1   英文名稱：   Soluble Iercellular Adhesion Molecule-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   sICAM-1  Ethyl 3-(3-amino-4-(methylamino)-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  中文名：  分子式：C18H22N4O3  度：98.0%

小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子 -1 (mouse sICAM-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D  Ethyl 2-ethoxy-1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-1H-benzimidazole-7-carboxylate  中文名：  分子式：C26H23N3O3  度：98.0%

小鼠可溶性瘦素受體elisa試劑盒   小鼠可溶性瘦素受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠可溶性瘦素受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性瘦素受體試劑盒、小鼠可溶性瘦素受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Ethyl 2-(4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate  中文名：  分子式：C13H13NO3S  度：98.0%
SF9細(xì)胞，昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞 細(xì)胞,Sw626細(xì)胞 基質(zhì)細(xì)胞裂解物HHGMCL麥芽糖醇質(zhì)量規(guī)格：>98%Maltitol

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98L-Threonine methyl ester

IGFBP4 Others Human  IGFBP4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸阿莫羅芬/鹽酸阿莫洛芬 （標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Amorolfine

大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1氨芐西林鈉/氨芐青霉素鈉質(zhì)量規(guī)格：>900μg/mg, USP,BRAmpicillin

IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氨芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定Ampicillin
QSG-7701細(xì)胞，肝細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,DLD-1細(xì)胞 CM-R053大鼠卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鄰苯二(>99.0%(GC))o-Phthalaldehyde 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)

大鼠腦細(xì)胞;C6丹磺(>95.0%(HPLC)(T))Dansyl Hydrazine質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)

CSF2RA Others Human  GM-CSFR 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DBD-H [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-肼基-2,1,3-苯并惡二唑(>98.0%(HPLC))DBD-H [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-hydrazino-2,1,3-benzoxadiazole] 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞cDNAHRPEpiC cDNANBD-H (=4-肼基-7-硝基-2,1,3-苯并惡二唑肼)(>98.0%(HPLC))NBD-H (=4-Hydrazino-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Hydrazine) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,3-環(huán)己二酮(>98.0%(GC)(T))1,3-Cyclohexanedione質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)
Furosemide  54-31-9  中文名：  分子式：C12H11ClN2O5S  度：98.0%      小鼠廋素受體   英文名稱：   Leptin receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Leptin R

Furazolidone  67-45-8  中文名：唑酮  分子式：C8H7N3O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠促黃體生成激素   英文名稱：   leinizing hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   LH

Fumaric acid  110-17-8  中文名：  分子式：C4H4O4  度：%  關(guān)鍵詞：  抗; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠溶菌酶   英文名稱：   Lysozyme   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Lysozyme

Fudosteine  13189-98-5  中文名：福多斯坦  分子式：C6H13NO3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

病毒H6亞型(AIV-H6)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)Fosaprepitant dimeglumine  265121-04-8  中文名：  分子式：C30H40F7N6O10P  度：98.0%      小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T