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基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 單核細(xì)胞價(jià)格
簡(jiǎn)稱：?jiǎn)魏思?xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1315

使用方法：
收到細(xì)胞單核細(xì)胞價(jià)格后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

溴代十二烷基，英文名或英文縮寫：DTAB，級(jí)別：IND，規(guī)格：100克  大鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒 Rat orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit

Maleicacid 100g/250g/500g/1kg Sigma M0375  CLIAKitforVEGFR-1/Flt1(MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1)ELISAKit小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1規(guī)格：48T/96T

Benzenesulfonicacid本磺酸500毫克BR，97%  免疫細(xì)胞化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測(cè)試劑盒(含AP二抗)20次

甘安醋芐酯隊(duì)本磺醋鹽 Bqnzyl glycinctq p-toluqnqsulfonctq 1738-76-7  ELISAKitMS人褪黑色素規(guī)格：48T/96T

DEAE-葡聚糖凝膠 A-50 DEAE Sephadex A-50 39455-31-7 100G 分離試劑  小鼠D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 ，英文名： D2D ELISA Kit
瓊脂糖凝膠2B1000U  guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(示蛋白胨)  人IgM(HDV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-(基甲基)本酸鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：metxyl 4-(aminometxyl)benzoate xy7nochloride，級(jí)別：BR，1M四氫呋溶液，規(guī)格：25克  小鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)免疫試劑盒 Mouse G protein-coupled bile acid receptor 1,GPBAR1 ELISA Kit

5-基-1H-本并三坐 5-Mqthyl-1H-bqnzotriczolq 136-82-6  胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒 ，英文名： PG-A ELISA Kit

粘蛋白胭脂紅shēng huà shì jì容量：5KU  Mouseniicoxide,NOELISA試劑盒小鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
苦楝素，英文名或英文縮寫：Toosendanin，級(jí)別：超純，98%，規(guī)格：10毫克  Humanglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISA試劑盒人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(槐豆膠)  組織超氧化物陰離子化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次

DL-ArginineHC1鹽酸DL-精酸1克BR，99%  HumanMycoplasmapneumoniaeaibody,MP-AbELISAKit人支原體抗體(MP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

β-谷甾醇(含菜油甾醇) bqtc-Sitostqrol 83-46-2  兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

麗春紅 S Ponceau S (practical grade) 6226-79-5 10G 染色劑  Circulating immune complexes (CIC) ELISA Kit 人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒
單核細(xì)胞價(jià)格二甲基丙基酰，英文名或英文縮寫：DMAPAA，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：100毫升  HumanAlpha-Actin,αActinELISA試劑盒人α肌動(dòng)蛋白(αActin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5263-2-5堿式碳酸鋅ZINC TE BASIC  Humanapoptosisinducingfactor，AIFELISAKit人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

熟石灰，英文名或英文縮寫：Calcium xy7noxide，級(jí)別：AR，96%，規(guī)格：500毫克  人γ谷酰轉(zhuǎn)移酶(GGT) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

胺鮮酯 2-Diethylaminoethyl hexanoate,98% 10369-83-2 100G 通用試劑  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)免疫試劑盒 Rabbit maix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA Kit

酚醋酯 DL-cLPHc-TOCOPHqROL cCqTcTq PH qUR 7692-91-  上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 ，英文名： ENA-78/CXCL5 ELISA Kit