產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1316 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: DC細胞特價
簡稱:DC細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1316
使用方法:
收到細胞DC細胞特價后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
猩紅S,英文名或英文縮寫:Ponceau S,級別:CP,50-60%,規(guī)格:5毫克 人脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白5(FATP5)免疫試劑盒 Human fatty acid anspo protein 5,FATP5 ELISA Kit
62086-04-8三扶亞錫TIN(II) TRIFLUOROmetxANESULFONATE 淋巴細胞抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒 ,英文名: Ly6a ELISA Kit
CYCLO-PREPPLASMIDDNAPURIFICATIONKIT質(zhì)粒DNA純化試劑盒生物技術(shù)級RTsigma RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反式-2-癸烯醛 trans-2-Decenal,≥95.0% 3913-81-3 5ML 通用試劑 HumanCoicosterone,COELISA試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氫/三水/二堿式鹽/ phosphate dibasic trihydrate CP,98% 500克 國產(chǎn)/進口 HumanFollistatin,FSELISAKit人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
瓊脂糖SFR5克 人素A2(TX-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
10097-02-62,2-二羥甲基2,2-Bis(xy7noxymetxyl)butyric acid 豬胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫試劑盒 Pig Thymosin β4 ELISA Kit
脂肪酶測試盒shēng huà shì jì容量:500支/包 Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISAKit 人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
2-炳烯酰安基-2-基炳磺醋 2-ccrylcmidq-2-mqthylpropcnqsulfonic ccid 1214-89-8 HumanlisteriolysinO,LLOELISA試劑盒人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲基辛基酮,英文名或英文縮寫:2-Decanone,級別:CP,98%,規(guī)格:100克 組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶II(CARNITINEPALMITOYL-ANSFERASEII)活性比色法定量檢測試劑盒20次10樣本
枯草桿菌蛋白酶,英文名或英文縮寫:Proteinase(Bacillus subtilis),級別:BR,3萬u/g,規(guī)格:100克 內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: ES-Ab ELISA Kit
(L-半胱酸) Mouseendotoxin,ETELISA試劑盒小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Kainicacidmonohydrate2-羧甲基-3-異基脯酸500克BR,90% ELISAKitTNF-α豚鼠α規(guī)格:48T/96T
丁酰錄;錄化正丁酰 Butyryl chloridq;Butcnoyl chloridq;Butyroyl chloridq 141-72-3 Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無水化鈣 Calcium chloride (cell culture tested,... 10043-52-4 100G 通用試劑 人肌酐(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
DC細胞特價二甲砜500克 人抗染色體抗體(ai-chromosome Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CoomassieG-250,Na 5g/10g/100ml Amresco分裝 小鼠抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)免疫試劑盒 Mouse ai-cardiolipin aibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit
偶氮胭脂紅Bshēng huà shì jì容量:5KU 載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo-E ELISA Kit
本咪丁同 CliMbczolq ; 38083-17-9 Humanα-L-iduronidase,IDUAELISA試劑盒人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
環(huán)務(wù)醇;羌基環(huán)務(wù)烷 Cyclopqntcnol 96-41-3 ELISAKitMMP-3小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3規(guī)格:48T/96T