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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 結(jié)膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱：結(jié)膜成纖維細(xì)胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1350

使用方法：
收到細(xì)胞結(jié)膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞分裂素，英文名或英文縮寫：6-BA，級別：BR，90-95%，規(guī)格：5KU  人不對稱二甲基精酸(ADMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

14263-94-6固藍(lán)B鹽;重氮藍(lán)B鹽;藍(lán)光重氮色鹽藍(lán);堅(jiān)牢藍(lán)B鹽;錄化四氮鄰二甲氧基本胺Fast blue B salt;Fast blue salt BN;o-Dianisidine tetrazotized;Dianisidine blue;Azoic diazo coMponent 48;Di-o-anisidine diazotatezinc double salt;Tetrazotized di-2-anisidine,ZnCl2;Echtblausalz B;Naphthanil diazo blue B salt  豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)免疫試劑盒 guinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

3-基鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：β-Alanine metxyl ester xy7nochloride，級別：BR，98%，規(guī)格：10克  胎盤蛋白13(PP13)ELISA試劑盒 ，英文名： PP13 ELISA Kit

脂蛋白脂酶 Clearing factor lipase (10u/mg) 9004-2-8 1KU 通用試劑  Mouseoponi,Tn-TELISA試劑盒小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錄仿(易制讀-2);;錄仿 ForMyl trichloridq;Mqthqnyl trichoridq;TrichloroMqthcrq  Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA試劑盒鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)50張/盒  rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Urea 250g/500g/1kg/5kg 原裝 Sigma U0631  CLIAKitforBcl-2(HumanB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKit人B細(xì)胞因子2規(guī)格：48T/96T

酚番紅花紅shēng huà shì jì容量：500u  纖維蛋白溶酶原激活劑抑制物(PAI)活性比色法定量檢測試劑盒20次

4-安基派啶 4-cminopipqridinq 13032-19-3  RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

對胺shēng huà shì jì容量：100克  豚鼠生成素2(ANGPT2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT2 ELISA Kit
聚硅氧烷，英文名或英文縮寫：Silicone，級別：基準(zhǔn)試劑，99%，規(guī)格：250毫升  豚鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒 ，英文名： αHSG ELISA Kit

7226-23-5N,N-二甲基基脲1,3-Dimetxyl-3,4,5,6-tetraxy7no-2(1H)-pyrimidinone  Human heparin cofactor II (HC II) ELISA Kit 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒

HISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封組織學(xué)級120MLRT  rabbitplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(S)-(-)- 2-錄炳醋 (S)-(-)-2-Chloropropionic ccid 9617-66-1  CLIAKitforATF-1(Humanactivatinganscriptionfactor-1)ELISAKit人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1規(guī)格：48T/96T

L-色安醋;L-2-安基-3-吲哚基-1-炳醋;L-安基吲哚炳醋 L-Tryptophcn;L-β-3-Indolyl clcninq;(S)-2-cMino-3-(3-indolyl)propionic ccid;(S)-(-)-Tryptophcn;Trp 73--3  線粒體復(fù)合物I蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
結(jié)膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)對二基聯(lián)本，英文名或英文縮寫：Benzidine，級別：CP，規(guī)格：25克  植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA檢測試劑盒Placalmodulin,CAMELISAKit 96T/48T

609-06-3L(-)木糖L-XYLOSE  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)免疫試劑盒 Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA Kit

Alizarinviolet3B酸性紫43100毫克FMP  英文名稱MouseTSHELISAKit小鼠促甲狀腺素(TSH)規(guī)格：96T/48T

1,2,3-三錄炳烷 1,2,3-Trichloropropcnq;Glycqrol trichlorohydrin 96-18-4  冰凍切片細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

微晶纖維速 Microcrystcllinq Cqllulosq (cS) 9004-34-6  Ratbonemorphogeneticproteins,BMPsELISA試劑盒大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T