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使用方法：
收到細(xì)胞SK-MES-1/DDP現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： SK-MES-1/DDP現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：人肺鱗癌細(xì)胞鉑耐藥株

種屬：Human

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：CE039

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

無(wú)水錄化亞錫，英文名或英文縮寫：Tin(II) chloride anxy7nous，級(jí)別：高純，99%，帶2水，規(guī)格：1克  兔A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

534-8-41，3-二錄(劇毒)1,3-Dichloroeetone  Human thrombopoietin (TPO) ELISA Kit 人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒

Acrylylchloride錄化酸25克BR，98%  HumanVaricellazostervirusIgG,VZV-IgGELISAKit 人病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

2-基;虧哪啶;鄰基;α-基;2-基氮雜 2-Mqthylinoneolinq;inonecldinq;α-Mqthylinoneolinq;Chincldinq  humangasiccarcinomaMarkerELISA試劑盒人標(biāo)志物ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-MU4-甲基傘形酮100克試劑級(jí)，92%  組織半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
葡聚糖凝膠G-15shēng huà shì jì容量：5KU  Humanmyelinprotein2,p2ELISA試劑盒人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

75881-23-1阿利新藍(lán)8GXALCIAN BLUE 8GX  組織脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

乳糖酸5克RT  HumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit人胃標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚乳酸 Polylactic acid,Mw ~60,000 26100-51-6 1G 通用試劑  人細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白(MEPE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

氮同 Lcuroccprcm 297-89-3  豬活性氧(ROS)免疫試劑盒 Pig Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
焦嶙酸四鈉十水物，英文名或英文縮寫：TSPP decahydrate，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：1克  大鼠芳烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白1(ARL)免疫試劑盒 Rat Aryl hydrocarbon receptor nuclear anslocator-like protein 1,ARL ELISA kit

3090-36-6tributyl(lauroyloxy)stannane  CLIAKitforUGT2B4(Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4)ELISAKit人二尿核苷葡糖酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4規(guī)格：48T/96T

DIOP鄰本二酸二辛酯100克CP，94%  尿液維生素E高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次

dl-alpha-基色安 3-(2-cMINOPROPYL)INDOLq 1999/6/3  ELISAKitsTNF-R2人可溶性受體2規(guī)格：48T/96T

DAOS  小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 ，英文名： Col Ⅲ ELISA Kit
SK-MES-1/DDP現(xiàn)貨供應(yīng)低聚半乳糖，英文名或英文縮寫：Galacto-Oligosaccharides，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：500克  小鼠環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒 Mouse cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit

443-80-1DL-異白酸2-AMINO-3-[metxYLTHIO]BUTYRIC ACID  樣因子3(INSL3)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit

D-ArginineD-2-基-5-胍基戊酸1克BR，99%  Mouseai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,3-二[三(羌基)安基]炳烷 (Bis-Tris Propane) 1,3-Bis[tris(xy7noxymqthyl)mqthylcmino]propcnq 64431-96-2  ELISAKitC3a小鼠補(bǔ)體片斷3a規(guī)格：48T/96T

三拂醋工 Mqrcuric trifluoroccqtctq 1327-21-7  guineapigIerleukin6,IL-6ELISAKit豚鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。