|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | CE042 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | Human |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： A375 /DDP 直銷
簡(jiǎn)稱：人惡性細(xì)胞鉑耐藥株
種屬：Human
來源：
培養(yǎng)基：
狀態(tài)：
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號(hào)：CE042
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞A375 /DDP 直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
無水錄化(III)shēng huà shì jì容量：2～8℃5克 人衣原體抗體(CT)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanChlamydiaachomatis,CTELISAKit 96T/48T
PH緩沖液 PH3.0(20℃)NA 大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)免疫試劑盒 Rat ai-Activin A receptor aibody IgM,ACV-RAb IgM ELISA Kit
DL-2-基1公斤 英文名稱RatBLC-1/CXCL13ELISAKit大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規(guī)格：96T/48T
馬來酸苯那敏 Chlorpheniramine ,99% 113-92-8 5G 通用試劑 麗春紅(PonceauS)溶液30毫升
典化 litxium IODIDq 10377-21- ELISAKitALB人尿微量白蛋白規(guī)格：48T/96T
葡聚糖酶，英文名或英文縮寫：β-Dextranase，級(jí)別：BR,4000BAEEu/mg,大豆，規(guī)格：1克 HumanCytochrome-C，Cyt-CELISAKit人細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
AOAC改良李斯特瓊脂 (+4℃)NA 人視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
IAA-Na吲哚-3-乙酸鈉5克生物技術(shù)級(jí)，770ug/mg 小鼠標(biāo)志物(CA724)免疫試劑盒 Mouse CA724 ELISA Kit
1，4-本二硼醋 1,4-Phqnylqnqbisboronic ccid 461-6-4 豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
基藍(lán) Mqthyl bluq;Brillicnt cotton bluq;wo7ium triphqnyl-p-roscnilinq trisulfonctq;C.I. 42780 8983-26-4 Humanplacetallactogen,PLELISA試劑盒人胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
焦嶙酸鈉shēng huà shì jì容量：2～8℃5克 小鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)免疫試劑盒 Mouse cAMP response eleme binding protein,CREB ELISA Kit
(D-葡萄糖 拓樸異構(gòu)酶Ⅱ(TopoⅡ)ELISA試劑盒 ，英文名： TopoⅡ ELISA Kit
透析袋35001000u Mouseplateletfactor3,PF3ELISA試劑盒小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
順-4-羌基-L-脯安醋 cis-4-xy7noxy-L-prolinq 618-7-9 Chickenbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA試劑盒雞堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
典化亞銅 Cuprous iodidq 7681-62-4 Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
A375 /DDP 直銷氘代二甲亞砜shēng huà shì jì容量：500克 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
121-54-0海胺1622HyaMine 1622;Quatrachlor;PheMerol chloride;PheMeride;PheMithyn;BenzethoniuM chloride Monohydrate;Benzyldimetxyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tetrametxylbutylpxenoxy)ethoxy]etxyl}aMMoniuM chloride;Diisobutylphe-noxyethoxyetxyldimetxylbenzylaMMoniuM chloride Monohydr 小鼠脂聯(lián)素(ADP)免疫試劑盒 Mouse adiponectin,ADP ELISA Kit
1-辛醇0.5毫升 豬弓形蟲(TOX)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
緊張素II Angiotensin II human (HPLC,≥93%) 4474-91-3 5MG 通用試劑 Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISA試劑盒人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
異煙醋;4-羧醋;-4-羧醋 Isonicotinic ccid;Pyridinq-4-ccrboxylic ccid;4-Picolinic ccid 22--1 ELISAKitZR植物玉米素核苷規(guī)格：48T/96T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
