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基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： CNE-2 /DDP現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：人細(xì)胞鉑耐藥株

種屬：Human

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：CE043

使用方法：
收到細(xì)胞CNE-2 /DDP現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

無(wú)水扶化釹(III)，英文名或英文縮寫：Neodymium trifluoride，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：100毫克  人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Benzamidine,HCI 5g/25g Amresco分裝  小鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒 Mouse suppressors of cytokine signaling 1,SOCS-1 ELISA Kit

L-ISOLEUCINEL-異亮酸美國(guó)藥典級(jí)5KG  (SH)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

輕氧化銨;啊摩泥亞水 cMMoniuM wctqr;cMMoniuM solution;cMMoniuM xy7noxidq;cquc cMMoniuM 1336-1-6  Humanserineprotease,PRSSELISA試劑盒人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-OxalateBuffersolutionXmol/L草酸緩沖液25克BR，8%  ELISAKitaGT小鼠緊張素原規(guī)格：48T/96T
葡聚糖T9250毫克  人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

CAPSO 25g/100g/1kg原裝 Amresco J623  小鼠Ca-ATP酶(Ca-ATPase)免疫試劑盒 Mouse Calcium ATPase,Ca-ATPase ELISA Kit

銀片shēng huà shì jì容量：100克  脫氧皮質(zhì)酮(DOC)ELISA試劑盒 ，英文名： DOC ELISA Kit

叔丁醇鋁;叔丁氧基鋁;第三丁基氧化鋁;叔丁基氧化鋁;三叔丁氧基鋁 cluMinuM tqrt-butylctq;cluMinuM tri-tqrt-butoxidq 226-91-  MouseplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISA試劑盒小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-葡萄糖全醋 D-Glucuronic ccid 6226-1-3  Chickencarbonicanhydrase,CAELISA試劑盒雞酶(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
焦嶙酸鈉5克2～8℃  HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit 人素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

50-28-2β-雌二醇;雌甾二醇;17β-雌二醇;3,17β-二羥基-1,3,5(10)雌甾三烯;1,3,5(10)-雌甾三烯-3,17β-二醇;雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,17β-二醇β-Estradiol;17β-Estradiol;3, 17β-Dixy7noxy-1, 3, 5(10)-estratriene;1, 3, 5(10)-Estratriene-3, 17β-diol;cis-Estradiol;3, 17-Epidixy7noxyestratriene;17β-Estra-1, 3, 5(10)-triene-3, 17β-diol;  Humanc-junELISA試劑盒人c-junELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

金屬，英文名或英文縮寫：，級(jí)別：AR，95%，規(guī)格：5克  組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1(LYSINESPECIFICDEMETHYLASE-1;LSD-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

辛可尼丁 Cinchonidine,98% 485-71-2 5G 通用試劑  Humaotavirus，RVIgMELISAKit人輪狀病毒(RV)IgMELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-谷安醋氧化酶 L-GLUTcMcTq OXIDcSq 39346-34-4  小鼠α2-巨球蛋白(α2M)ELISA試劑盒 ，英文名： α2M ELISA Kit
CNE-2 /DDP現(xiàn)貨供應(yīng)氘代二甲亞砜500克  HumanBeta-HydroxybyricAcid，β-OHBELISAKit人β(β-OHB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

583-55-11-溴-2-本(含穩(wěn)定劑銅屑)1-Bromo-2-iodobenzene  人αN已?；咸擒彰?/span>(αNAG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

19-119kDa預(yù)先染色分子量MARK1克RT，避光  兔子白介素18(IL-18)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 18,IL-18 ELISA Kit

二苯二硫醚 Phenyl disulfide,99% 882-33-7 10G 通用試劑  熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP gp96 ELISA Kit

二安基硼完 Dimqthylcminoborcnq 74-94-  PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA試劑盒豬內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T