產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1337 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 星形膠質(zhì)細(xì)胞直銷
簡稱:星形膠質(zhì)細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1337
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞星形膠質(zhì)細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
腺嘌呤核苷,英文名或英文縮寫:Adenosine,級別:BR,60%,規(guī)格:800u Ratbonealkalinephosphatase,BALPELISA試劑盒大鼠骨堿性酶(BALP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
298-93-11唑藍(lán)Thiazolyl Blue Humancoloncancer-specificaigen-3,CCSA-3ELISA試劑盒人專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PEG8000,30%IN1.6MNACL聚乙二醇8000溶液生物技術(shù)級淡黃色液體RTsigma HumanFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
α-代肉桂醛 α-Chlorocinnamaldehyde,97% 18365-42-9 5G 通用試劑 牛雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
硫化鎘/鎘黃/鎘桔黃/硫鎘礦/Cadmium sulfide CP,95%, 100克 國產(chǎn) 人受體相關(guān)因子6(AF6)免疫試劑盒 Human tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,AF6 ELISA kit
羥基乙酸鈉shēng huà shì jì容量:1克 人血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒HumanFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T
9045-23-2β-乳球蛋白 (+4℃)BETA-LACTOGLOBULIN 大鼠激動異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒 Rat cytokinin MB,CKMB ELISA Kit
5-溴-2-脫氧胞苷5克 英文名稱RatCD40LELISAKit大鼠CD40L規(guī)格:96T/48T
2,4-二羥基-6-甲基... 2,4-Dihydroxy-6-methylbenzoic acid,97% 480-64-8 250MG 通用試劑 可溶性真菌/酵母細(xì)胞膜蛋白(粗提)制備試劑盒20次
L-半胱安醋言醋鹽;(R)-2-安基-3-巰基炳醋言醋鹽 L-Cystqinq xy7nochloridq;L(+)-α-cMino-β-thiopropionic ccid xy7nochloridq;L(+)-cMino-α-Mqrccptopropionic ccid xy7nochloridq 7048-4-6 ELISAKitTetanusAb人破抗體規(guī)格:48T/96T
均三溴,英文名或英文縮寫:1,2,3-Tribromopropane,級別:AR,97%,規(guī)格:25毫克 Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISA試劑盒人17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磺酰錄( Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-基酮,英文名或英文縮寫:AMAC,級別:BR,規(guī)格:5克 人白三烯E4(LTE4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
七葉皂苷 Escin (HPLC,≥98%) 6805-41-0 20MG 通用試劑 兔子髓1脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒 Rabbit myelin basic protein,MBP ELISA Kit
Dq52 Prq-swollqn cIqC Mqdic (Dqcq-纖維速) 視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)ELISA試劑盒 ,英文名: RBP4 ELISA Kit
星形膠質(zhì)細(xì)胞直銷對叔丁基本酸,英文名或英文縮寫:PTBBA,級別:BR,99%,規(guī)格:250毫克 主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒 ,英文名: MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit
(2-(N-啉)乙磺酸) HumanansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9-Fluorenylmetxanol芴100毫克AR,98% ELISAKitTCCC5b-9小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9規(guī)格:48T/96T
4,4,4 -三拂-1-本基-1,3-丁二同 99% BqNZOYL-1,1,1-TRIFLUOROcCqTONq 1936/6/7 Humanai-OJ-aibody,OJ/IleRSELISAKit人OJ抗體/抗異亮氨酰NA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Furoicacid呋酸5克BR 人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。