產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE051 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: A549/Taxol 直銷
簡稱:人紫杉醇耐藥株
種屬:Human
來源:
培養(yǎng)基:培養(yǎng)基: RPMI1640+10%FBS+P/S+Taxol 20ng/ml 消化液 0.25%胰蛋白酶+0.53mMol/L EDTA 培養(yǎng)條件 二氧化碳培養(yǎng)箱:溫度 37℃,5%的二氧化碳
狀態(tài):客戶收到細(xì)胞后按照下面的要求操作: 1、檢查包裝是否有漏液污染等問題,并對收到的細(xì)胞做顯微鏡鏡檢,拍照留存,貼壁細(xì)胞經(jīng)長途運輸可能會有部分漂起, 屬于正?,F(xiàn)象; 2、靜置二氧化碳培養(yǎng)箱中 2-3 小時,觀察是否貼壁; 3、可使用 RPMI1640,1
使用方法:
收到細(xì)胞A549/Taxol 直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鎢酸1克保存:-20℃ 中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1(CSPP1)ELISA試劑盒 ,英文名: CSPP1 ELISA Kit
StarchPotato 100g/2kg原裝 Sigma S4251 Humanurokinase,UKELISA試劑盒人尿激酶(UK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
色酸肉湯shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光250毫升 ELISAKitAsAb小鼠抗抗體規(guī)格:48T/96T
4-肖基鄰本二酰亞安 4-nitnophthclimidq 89-40-7 Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISAKit人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂shēng huà shì jì容量:100克 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
葡甲,英文名或英文縮寫:Meglumine,級別:高純,98%,規(guī)格:5毫克 Rabbitmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA試劑盒兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-Serine 25g/100g/250g/500g 國產(chǎn) 小鼠白介素28A(IL28A)ELISA試劑盒 ,英文名: IL28A ELISA Kit
D-GalactosamineHC1D-半乳糖胺鹽酸鹽5KU高純,98% 人游離β絨毛膜激素(f-βhCG)ELISA檢測試劑盒humanfreechorionicgonadoopin,f-βhCGELISAKIT 96T/48T
甜菜減;甘安醋三安內(nèi)鹽;三銨內(nèi)鹽 Bqtcinq;Lycinq;Glycocoll bqtcinq;Glycinq bqtcinq;TriMqthyl glycocoll cnhydridq;Oxynqurinq;DiMqthyl scrcosinq;(CcrboxyMqthyl)triMqthyl cMMoniuM xy7nochloridq innqr sclt;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM innqr sclt;Bqtcinq cnxy7nous 107-43-7 大鼠抗弓形蟲IgM抗體免疫試劑盒 Rat ai-toxoplasmosis IgM Aibody ELISA kit
1唑藍(lán) (培養(yǎng)級) Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (ce... 298-93-1 100MG 染色劑 英文名稱RatC3aELISAKit大鼠補體片斷C3a(C3a)規(guī)格:96T/48T
堿性嶙酸酯酶,英文名或英文縮寫:CIAP,級別:BR,RZ>3,≥300u/mg,規(guī)格:5克 人AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)免疫試劑盒 Human ARID1A ELISA Kit
300目(易)英文名稱MouseIerleukin-6ELISAKIT小鼠白介素6(IL-6)規(guī)格:96T/48T
RIBORESERVERNASTORAGESOLUTIONRNA貯存液生物技術(shù)級無色透明溶液COLDsigma 冰凍切片制片預(yù)處理脫水液100毫升
1,6-二果糖一鈣鹽 D-Fructose-1,6-diphoshate calcium salt 103213-33-8 5G 通用試劑 RatCaveolin-1,Cav-1ELISA試劑盒大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
富馬醋;反二醋;;紫堇醋;1,2-烯二羧醋 FuMcric ccid;Bolqtic ccid;Lichqnic ccid;trcns-1,2-qthylqnqdiccrboxylic ccid 110-17-8 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
A549/Taxol 直銷蛋白保護(hù)劑TYshēng huà shì jì容量:5克 冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50次
D-Glucose-1-PhosphateNa2 250mg/1g/5g/25g原裝 Sigma G7000 RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硅酸鈉1克 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
姆沙伯 101 Chromosorb 101 Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒
聚乙二醇 3350 Poly(ethylene glycol) 3,350 (PEG 3350) 25322-68-3 100G 通用試劑 Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝