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| 產(chǎn)地 | 科研 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | CE051 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細胞形態(tài) | |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | Human |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： A549/Taxol 直銷
簡稱：人紫杉醇耐藥株
種屬：Human
來源：
培養(yǎng)基：培養(yǎng)基: RPMI1640+10%FBS+P/S+Taxol 20ng/ml 消化液 0.25%胰蛋白酶+0.53mMol/L EDTA 培養(yǎng)條件 二氧化碳培養(yǎng)箱:溫度 37℃,5%的二氧化碳
狀態(tài)：客戶收到細胞后按照下面的要求操作： 1、檢查包裝是否有漏液污染等問題，并對收到的細胞做顯微鏡鏡檢，拍照留存，貼壁細胞經(jīng)長途運輸可能會有部分漂起， 屬于正?，F(xiàn)象； 2、靜置二氧化碳培養(yǎng)箱中 2-3 小時，觀察是否貼壁； 3、可使用 RPMI1640，1
使用方法：
收到細胞A549/Taxol 直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鎢酸1克保存：-20℃ 中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1(CSPP1)ELISA試劑盒 ，英文名： CSPP1 ELISA Kit
StarchPotato 100g/2kg原裝 Sigma S4251 Humanurokinase,UKELISA試劑盒人尿激酶(UK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
色酸肉湯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光250毫升 ELISAKitAsAb小鼠抗抗體規(guī)格：48T/96T
4-肖基鄰本二酰亞安 4-nitnophthclimidq 89-40-7 Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISAKit人抗巨細胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂shēng huà shì jì容量：100克 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
葡甲，英文名或英文縮寫：Meglumine，級別：高純，98%，規(guī)格：5毫克 Rabbitmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA試劑盒兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-Serine 25g/100g/250g/500g 國產(chǎn) 小鼠白介素28A(IL28A)ELISA試劑盒 ，英文名： IL28A ELISA Kit
D-GalactosamineHC1D-半乳糖胺鹽酸鹽5KU高純，98% 人游離β絨毛膜激素(f-βhCG)ELISA檢測試劑盒humanfreechorionicgonadoopin,f-βhCGELISAKIT 96T/48T
甜菜減;甘安醋三安內(nèi)鹽;三銨內(nèi)鹽 Bqtcinq;Lycinq;Glycocoll bqtcinq;Glycinq bqtcinq;TriMqthyl glycocoll cnhydridq;Oxynqurinq;DiMqthyl scrcosinq;(CcrboxyMqthyl)triMqthyl cMMoniuM xy7nochloridq innqr sclt;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM innqr sclt;Bqtcinq cnxy7nous 107-43-7 大鼠抗弓形蟲IgM抗體免疫試劑盒 Rat ai-toxoplasmosis IgM Aibody ELISA kit
1唑藍 (培養(yǎng)級) Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (ce... 298-93-1 100MG 染色劑 英文名稱RatC3aELISAKit大鼠補體片斷C3a(C3a)規(guī)格：96T/48T
堿性嶙酸酯酶，英文名或英文縮寫：CIAP，級別：BR，RZ>3,≥300u/mg，規(guī)格：5克 人AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)免疫試劑盒 Human ARID1A ELISA Kit
300目(易)英文名稱MouseIerleukin-6ELISAKIT小鼠白介素6(IL-6)規(guī)格：96T/48T
RIBORESERVERNASTORAGESOLUTIONRNA貯存液生物技術(shù)級無色透明溶液COLDsigma 冰凍切片制片預處理脫水液100毫升
1,6-二果糖一鈣鹽 D-Fructose-1,6-diphoshate calcium salt 103213-33-8 5G 通用試劑 RatCaveolin-1,Cav-1ELISA試劑盒大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
富馬醋;反二醋;;紫堇醋;1，2-烯二羧醋 FuMcric ccid;Bolqtic ccid;Lichqnic ccid;trcns-1,2-qthylqnqdiccrboxylic ccid 110-17-8 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
A549/Taxol 直銷蛋白保護劑TYshēng huà shì jì容量：5克 冰凍切片免疫組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎檢測試劑盒(無一抗和二抗)50次
D-Glucose-1-PhosphateNa2 250mg/1g/5g/25g原裝 Sigma G7000 RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硅酸鈉1克 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
姆沙伯 101 Chromosorb 101 Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒
聚乙二醇 3350 Poly(ethylene glycol) 3,350 (PEG 3350) 25322-68-3 100G 通用試劑 Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
