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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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馬鏈球菌獸疫亞種( SEZ)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-P63937
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-03
  • 更新日期: 2024-11-25
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BK-P63937
用途 公司產品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產品名稱

規(guī)格

貨號

馬鏈球菌獸疫亞種( SEZPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)

50T

BK-P63937

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,65,4,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ketoconazole  中文名:酮康唑  分子式:C26H28Cl2N4O4 

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Jacaranone  60263-07-2  中文名:  分子式:C9H10O4  度:98.0%  關鍵詞:  細胞毒活性; 果膠幼蟲變態(tài)誘導劑; 千里光屬; 雪葉蓮屬; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ketoconazole  65277-42-1  中文名:酮康唑  分子式:C26H28Cl2N4O4  度:98.0%  關鍵詞: 

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Jacaranone  中文名:  分子式:C9H10O4  度:98.0%

小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Ketoconazole  65277-42-1  中文名:酮康唑  分子式:C26H28Cl2N4O4
T84細胞,細胞 色素瘤細胞,NW38細胞 EB病毒轉化的B細胞;KMY0919L-天門冬氨酸1-甲酯L-Aspartic acid 1-methyl ester質量規(guī)格:>98%,BR

HCC1937(癌細胞) 5×106cells/瓶×2L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽L-Aspartic acid β-methyl ester 質量規(guī)格:0.98

ARSA Others Mouse 小鼠 ARSA 細胞裂解液 (陽性對照) S-甲基-L-半胱氨酸S-Methyl-L-cysteine質量規(guī)格:98%,進口分包

Burkkit瘤細胞;DaudiS-三苯甲基-L-半胱氨酸S-Trityl-L-cysteine質量規(guī)格:>98%

CTNNB1 Others Mouse 小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸1-甲酯L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester質量規(guī)格:0.97
TE-10細胞,細胞 腦膠質母細胞瘤細胞,TG-905細胞 家貓皮膚細胞;FCA-S1試亞鐵靈Ferroin indicator solution質量規(guī)格:AR

Calu-1(細胞) 5×106cells/瓶×2鈣紅,乙二醛縮雙(鄰氨基酚)Glyoxal-bis(2-hydroxyanil)質量規(guī)格:AR;98%

PTPRC Others Human  CD45 細胞裂解液 (陽性對照) 羥基萘酚藍Hydroxynaphthol blue質量規(guī)格:金屬滴定指示劑

小鼠前細胞;MFC硼試劑1-Hydroxy-4-p-toluidinoanthraquinone質量規(guī)格:AR

海馬星形膠質細胞(HA-h)(1×106)石蕊Litmus質量規(guī)格:AR
Rosiglitazone  122320-73-4  中文名:羅格列酮  分子式:C18H19N3O3S  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ropivacaine mesylate  854056-07-8  中文名:甲磺酸羅哌卡因  分子式:C18H30N2O4S  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠肌球蛋白(MYS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Ropivacaine   98717-15-8  中文名:鹽酸羅哌卡因  分子式:C17H27ClN2O  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠調節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Roflumilast  162401-32-3  中文名:羅氟司特  分子式:C17H14Cl2F2N2O3  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名:苯甲酸利扎曲坦  分子式:C22H25N5O2  度:98.0%      馬鏈球菌獸疫亞種( SEZ)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)鼠血清(NO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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