產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3210 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】:鮑樣病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】:Abalone Herpeslike Virus(AbHV)PCR
【貨號(hào)】:BKP3210
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
鮑樣病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Mouse 17-ANP ELISA Kit 96T/48T 小鼠17-羥-孕酮(17-ANP)
Mouse T3 ELISA Kit 96T/48T 小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)
Mouse T4 ELISA Kit 96T/48T 小鼠甲狀腺素(T4)
Mouse Free-T4 ELISA Kit 96T/48T 小鼠游離甲狀腺素(Free-T4)
Mouse Free-T3 ELISA Kit 96T/48T 小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)
Mouse NN-T4 ELISA Kit 96T/48T 小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)
Mouse Insulin ELISA Kit 96T/48T 小鼠胰島素(Insulin)
Mouse C-Peptide ELISA Kit 96T/48T 小鼠C-肽(C-Peptide)
Mouse ATH ELISA Kit 96T/48T 小鼠促腎上腺激素皮質(zhì)激素(Mouse ATH)
Mouse HCG ELISA Kit 96T/48T 小鼠絨毛激素(HCG)
Mouse LH ELISA Kit 96T/48T 小鼠促黃體激素(LH)
Mouse FSH ELISA Kit 96T/48T 小鼠促卵泡生長激素(Mouse FSH)
Mouse Prolactin ELISA Kit 96T/48T 小鼠促乳素(Prolactin)
Mouse Soluble CD30 ligand ELISA Kit 96T/48T 小鼠CD30配體(sCD30 L)
ACE2 緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體 0.1ml
ACEI 緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體 0.1ml
Acetyl CoA Carboxylase 乙酰輔酶A羧化酶抗體 0.2ml
Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體 0.1ml
ACD 腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體 0.2ml
ACHE/Acetylcholinesterase 乙酰膽堿酶抗體 0.1ml
Acinus Acinus抗體 0.2ml
phospho-Acinus(Ser1180) 磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體 0.1ml
Ack1 醋酸激酶1抗體 0.2ml
Phospho-Ack1(Tyr859/860) 磷酸化Ack1抗體 0.1ml
Phospho-Ack1(Tyr284) 磷酸化Ack1抗體 0.1ml
Phospho-Ack1(Tyr326) 磷酸化Ack1抗體 0.1ml
ACSL1 長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體 0.2ml
ACTH (1-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體 0.1ml
Phospho-MKP1 (Ser318) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體 0.1ml
ACTH (18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體 0.1ml
ACTH (7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體 0.1ml
Actin α/alpha-SMA 肌動(dòng)蛋白α(α-SMA)抗體 0.1ml
Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白/α-SCA抗體 0.1ml
鮑樣病毒PCR檢測試劑盒說明書alpha Actinin 4 α-輔肌動(dòng)蛋白4抗體 0.2ml
F-Actin 纖維狀肌動(dòng)蛋白抗體 0.1ml
ACOT8 ?;o酶A硫酯酶8 0.2ml
Agpat2 溶血磷脂酸酰基轉(zhuǎn)移酶β抗體 0.2ml
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/p>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。