產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3238 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
溫和氣單胞菌PCR檢測試劑盒說明書 | Aeromonas sobriaPCR | BKP3238 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Stavudine 中文名:司他夫定 分子式:C10H12N2O4 植物RNA提取試劑盒(溶液法) 24ml
Stauntosaponin A 中文名: 分子式:C28H38O7 PlanNAplus 40ml
Stanozolol 中文名:康力龍 分子式:C21H32N2O 質(zhì)粒大量提取試劑盒 5T
Stanolone 中文名:雄諾龍 分子式:C19H30O2 PlasmidMaxiKit 10T
Sprengerinin C 中文名: 分子式:C44H70O16 植物草酸氧化酶(OxO)ELISA試劑盒
Periplocogenin 112899-63-5 中文名: 分子式:C28H42O6 Humanai-PL7-aibodyELISAKit 人PL7抗體/抗蘇氨酰NA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Wallicoside 88797-59-5 中文名:斷節(jié)參苷 分子式:C61H98O26 HumanelonginA,EloAELISA試劑盒人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Periplocoside N 39946-41-3 中文名: 分子式:C27H44O6 組織PIM1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Trillin 14144-06-0 中文名:延齡草苷 分子式:C33H52O8 humanPepsinogenC,PG-CELISAKit人胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
rsodeoxycholic acid 128-13-2 中文名:熊去氧膽酸 分子式:C24H40O4 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溫和氣單胞菌PCR檢測試劑盒說明書1--4-正辛基苯(>99.0%(GC)(T)) trans-4-Butylcyclohexanecarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(T) ELISAKitDHEA-S人脫氫表雄同酯規(guī)格:48T/96T
1--4-壬基苯(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-nonylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 ,英文名: Aβ1-42 ELISA Kit
1--4-戊苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-pentylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISA檢測試劑盒Humanmicrotubule-associatedprotein2,MAP-2ELISAKit 96T/48T
1--4-己苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-hexylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)試劑盒 Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
1--4-庚苯(含穩(wěn)定劑銅屑)(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-heptylbenzene (stabilized with Copper chip) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 英文名稱RatT4ELISAKit大鼠甲狀腺素(T4)規(guī)格:96T/48T
1--4-正辛基苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-n-octylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 酵母多酚氧化酶(polyphenoloxidase;PPO)活性比色法定量檢測試劑盒20
1--4-癸基苯(>88.0%(GC)) 1-Bromo-4-decylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>88.0%(GC) ELISAKitMT人褪黑素規(guī)格:48T/96T
1--4-十二烷基苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-dodecylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 小鼠淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 ,英文名: Aβ1-40 ELISA Kit
1--4-十二烷基苯(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-dodecylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 人套膜蛋白(iNV)ELISA檢測試劑盒HumanInvolucrin,iNVELISAKit 96T/48T
1--4-丁基苯(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-butylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 大鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)試劑盒 Rat prothrombin fragme 1+2,F1+2 ELISA Kit
Celite硅藻土,酸洗(用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A) Celite, acid-washed 質(zhì)量規(guī)格:用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A 犬骨堿性0酸酶(BALP)試劑盒 Canine bone Alkaline Phosphatase,BALP ELISA Kit
Celite® 硅藻土545(助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined)) Celite® 545 質(zhì)量規(guī)格:助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined) 犬骨橋素(OPN)ELISA檢測試劑盒CanineOsteopoin,OPNELISAKit 96T/48T
氯己定(標準品) Chlorhexidine 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5% 犬骨橋素(OPN)試劑盒 Canine Osteopoin ELISA Kit
香茅醇(分析標準品,≥99.0%(GC)) β-Citronellol 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.0%(GC) 犬骨形成蛋白-1(BMP-1)試劑盒 Canine bone morphogenetic protein 1,BMP-1 ELISA Kit
多菌靈標準溶液(100μg/ml,u=3%) Carbendazim solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3% 犬固酮(ALD)試劑盒 Canine aldosterone,ALD ELISA Kit
多菌靈標準溶液(10μg/ml,u=3%) Carbendazim solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3% 犬胱天蛋白酶12(Casp-12)試劑盒 Canine Caspase 12,Casp-12 ELISA Kit
屈(標準品) Chrysene 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 犬紅細胞生成素(EPO)試劑盒 Dog Erythropoietin,EPO ELISA Kit
西維因(標準品) Carbaryl 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,>99.5%(HPLC) 犬環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒 Canine cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
毒死蜱(標準品) Chlorpyrifos 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99% 犬環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒 Canine cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
滅蠅胺標準溶液(10μg/ml,u=2%) Cyromazin solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2% 犬環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒 Dog cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA kit
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:溫和氣單胞菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。