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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：雞喉病毒即禽病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Tokinolide B  112966-16-2  中文名：  分子式：C24H28O4    組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次

Methyl 4-O-feruloylquinate  195723-10-5  中文名：  分子式：C18H22O9    HumanPlacealalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit人胎盤堿性0酸酶(PLAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Trehalose  99-20-7  中文名：海藻糖  分子式：C12H22O11    兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Chlorogenic acid  327-97-9  中文名：綠原酸  分子式：C16H18O9    Human plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒

Ethyl rutinoside  187539-57-7  中文名：蕓香糖乙苷  分子式：C14H26O10    HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
3,3-Dimethylacrylic acid  541-47-9  中文名：千里光酸  分子式：C5H8O2    兔子緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Campsiketalin  93675-96-8  中文名：  分子式：C10H20O4    Rat von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 大鼠性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒

Macranthoin G  159934-13-1  中文名：灰氈毛忍冬素G  分子式：C26H26O12    Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 人β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

5-O-Ethylcleroindicin D  488138-32-5  中文名：  分子式：C10H16O4    HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA試劑盒人脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-Hydroxymethyl-2-furoic acid  6338-41-6  中文名：5-羥甲基-2-糠酸  分子式：C6H6O4    組織ITK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
雞喉病毒即禽病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書生長(zhǎng)激素釋放因子-2  GHRP-2  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 96T/48T

胰素樣肽-2（1-34)，人  GLP-2 (1-34) (human)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 Rat heat shock protein 40,hSP-40 ELISA Kit

胰素（1-29），牛，人，豬  Glucagon (1 - 29), bovine,human, porcine  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱RatFollistatinELISAKit大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

胰素（19-29），牛，人，豬  Glucagon (19 - 29), bovine,human, porcine  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 基質(zhì)膠體法人體胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10

胰素樣肽Ⅰ（7-36）酰胺，人  Glucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR ELISAKitCTX人細(xì)胞規(guī)格：48T/96T

激素釋放激素相關(guān)蛋白（1-13），人  Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 ，英文名： PARC/CCL18 ELISA Kit

海沙瑞林  Hexarelin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 96T/48T

組胺素5  Histatin 5  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人白介素23(IL-23)試劑盒 Human Ierleukin 23,IL-23 ELISA Kit

惡性因子（1-34）酰胺，人  Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱MousetotalhemolyticcomplemeELISAKit小鼠總?cè)苎a(bǔ)體(CH50)規(guī)格：96T/48T

惡性因子（1-34）， 人  Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR PDGF-A蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
L鼠李糖 HPLC≥98% 100mg MouseHexokinase,HKELISA試劑盒小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L絲氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L蘇氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA試劑盒小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L天冬氨酸 HPLC≥99% 200mg MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L天冬酰胺 HPLC≥98% 200mg MouseHistamine,HISELISAKit小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L纈氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHistamine,HISELISA試劑盒小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L異亮氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHistoneDeacetylase,HDELISAKit小鼠組織蛋白去乙?；?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L組氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L組氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 200mg Mousehiston-H2bELISAKit小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Milataxel HPLC≥98% 20mg Mousehiston-H2bELISA試劑盒小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。