產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3296 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
禽病毒1型PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Avian Nephritis Virus 1(ANV1)1RTPCR | BKP3296 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:禽病毒1型PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Torososide A 中文名: 分子式:C38H32O15 度:% 兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒
Floribundone 1 中文名: 分子式:C32H22O10 度:99.0% 兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒
Rubianthraquinone 中文名: 分子式:C16H12O5 度:98.0% 兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒
6-Hydroxyrubiadin 中文名:6-羥基甲基異茜草素 分子式:C15H10O5 度:97.5% 兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒 兔子α2抗纖溶酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子α2抗纖溶酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子α2抗纖溶酶試劑盒、兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
1,5,15-Tri-O-methylmorindol 中文名: 分子式:C18H16O6 度:98.0% 兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒 兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒、兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Fingolimod 162359-55-9 中文名:芬戈莫德 分子式:C19H33NO2 兔子氧化(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol 899822-99-2 中文名: 分子式:C19H31NO5 Rat angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 大鼠生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 899822-97-0 中文名: 分子式:C17H25NO3 HumanAi-mitochondriaaoaibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 928165-59-7 中文名: 分子式:C17H25ClO Humancytotoxin,CTXELISA試劑盒人細(xì)胞(CTX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
n-Octylbenzene 2189-60-8 中文名: 分子式:C14H22 組織IKKα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
禽病毒1型PCR檢測試劑盒價(jià)格促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),人 ACTH(1-39),human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)ELISA檢測試劑盒Humanmacrophagestimulatingprotein,MSPELISAKit 96T/48T
促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),大鼠 ACTH (1-39), rat 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠熱休克因子1(HSF1)試劑盒 Rat Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit
促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39),人 ACTH (18-39), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱RatETaR大鼠內(nèi)皮素受體A規(guī)格:96T/48T
促腎上腺皮質(zhì)激素(4-10),人 ACTH (4-10), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 基因甲基化檢測DNA修飾試劑盒20
髓質(zhì)肽(22-52),人 Adrenomedullin (22-52),human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitICAM-2/CD102人細(xì)胞間粘附分子2規(guī)格:48T/96T
咽側(cè)體抑制素Ⅳ Allatostatin IV 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒 ,英文名: sIgA ELISA Kit
糊精肽,人 Amylin,human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠酶2(CA-2)ELISA檢測試劑盒Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 96T/48T
緊張素A Angiotensin A 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人白介素23受體(IL-23R)試劑盒 Human IL-23R ELISA Kit
緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑 Angiotensin ConvertingEnzyme Inhibitor 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱MouseHistoneDeacetylaseELISAKit小鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)規(guī)格:96T/48T
緊張素原(1-14),大鼠 Angiotensinogen (1-14) ,Rat 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PCR探針TAG聚合酶標(biāo)記試劑盒10
MQAE(氯離子熒光探針) N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分 兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA檢測試劑盒deoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T
特立氟胺 A771726 (Teriflunomide) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)抑制劑 兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA檢測試劑盒rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit 96T/48T
當(dāng)歸?;昝仔?/span>H(標(biāo)準(zhǔn)品) Angeloylgomisin H 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA檢測試劑盒rabbitiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit 96T/48T
美曲勃龍(R-1881) Methyltrienolone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA檢測試劑盒rabbitiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 96T/48T
克羅米通 Crotamiton 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA檢測試劑盒rabbitplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 96T/48T
氯磺隆 Chlorosulfuron 質(zhì)量規(guī)格:>93%,BR 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA檢測試劑盒rabbitplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 96T/48T
L-墨蝶呤 L-Sepiapterin 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,美國進(jìn)口 兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA檢測試劑盒rabbitthrombomodulin,TMELISAKit 96T/48T
莫特塞尼 Motesanib 質(zhì)量規(guī)格:>99% 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA檢測試劑盒rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 96T/48T
金松雙黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Sciadopitysin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔子血小板活化因子(PAF)ELISA檢測試劑盒rabbitplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T
10-羥基癸烯酸,10-HDA(標(biāo)準(zhǔn)品) 10-Hydroxy-2-decenoic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔子血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA檢測試劑盒rabbitplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。