產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3213 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒直銷 | Absidia corymbiferaPCR | BKP3213 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Schleicheol 2 中文名: 分子式:C30H52O2 大鼠白三烯C4elisa試劑盒 大鼠白三烯C4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠白三烯C4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠白三烯C4試劑盒、大鼠白三烯C4 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Schleicheol 1 中文名: 分子式:C30H52O2 植物維生素C(VC)ELISAkit
S-Benzyl-L-cysteine 中文名:S-芐基-L-半胱氨酸 分子式:C10H13NO2S α-銀環(huán)蛇(α-BGT)ELISAKit
Sarsasapogenin 中文名:菝葜皂苷元 分子式:C27H44O3 大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISAKit
Sarmentocymarin 中文名: 分子式:C30H46O8 霉(AFT)ELISAKit
Pregnenolone 145-13-1 中文名:孕烯醇酮 分子式:C21H32O2 People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)ELISA試劑盒
組織總0含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one 中文名: 分子式:C10H12N2O2
組織因子抑制物 (TFPI) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Quinestrol 中文名:炔雌醇環(huán)戊醚 分子式:C25H32O2 度:98.0%
組織因子抑制物 英文名稱: tissue factor protein inhibitor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TFPⅠ Quinocetone 中文名:喹烯酮 分子式:C18H14N2O3
組織因子 英文名稱: tissue factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TF Quinocetone 中文名:喹烯酮 分子式:C18H14N2O3 度:98.0%
傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒直銷油酸酰胺(>65.0%(GC)) Oleamide 質(zhì)量規(guī)格:>65.0%(GC) 英文名稱RatActi-vatedproteinCELISAKit大鼠活化蛋白C規(guī)格:96T/48T
正辛酰胺(>98.0%(GC)(N)) n-Octanamide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) 酵母菌SD-P/HIS培養(yǎng)基100毫升
硬脂酰胺(>90.0%(GC)) Stearamide 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) ELISAKitCA人酶規(guī)格:48T/96T
丁基鄰苯二甲酰羥乙酸丁酯(>95.0%(GC)) Butyl Phthalyl Butyl Glycolate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒 ,英文名: PROZ ELISA Kit
間苯二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC)) Bis(2-ethylhexyl) Isophthalate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人前白蛋白(PA)ELISA檢測試劑盒Humanprealbumin,PAELISAKit 96T/48T
三戊酯(>98.0%(GC)) Triamyl Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 大鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS/NOS3)試劑盒 Rat Endothelial niic oxide syhase,eNOS/NOS3 ELISA Kit
三(2-氯乙基)酯(>97.0%(GC)) Tris(2-chloroethyl) Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 英文名稱RatBradykinin(BK)ELISAKit大鼠緩激肽酶聯(lián)分析(BK)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
三(1,3-二氯-2-丙基)酯(>95.0%(GC)) Tris(1,3-dichloro-2-propyl) Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 酵母菌SD-P/URA培養(yǎng)基100毫升
三(2-氧乙基)酯(>95.0%(GC)) Tris(2-butoxyethyl) Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) ELISAKit親環(huán)蛋白人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶規(guī)格:48T/96T
2-乙基己基二苯酯(>90.0%(GC)) 2-Ethylhexyl Diphenyl Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 小鼠蛋白p53(TP53)ELISA試劑盒 ,英文名: TP53 ELISA Kit
7,8-二氫-L-生物蝶呤 7,8-Dihydro-L-biopterin 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒PorcineFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T
生物蝶呤-d3 Biopterin-d3 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬血小板活化因子(PAF)ELISA檢測試劑盒Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T
(6R)-四氫-L-硫酸生物蝶呤-d3(非對映) (6R)-Tetrahydro-L-biopterin-d3 Sulfate(Mixture of Diastereomers) 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬(INS)ELISA檢測試劑盒PorcineInsulin,INSELISAKit 96T/48T
(6S)-四氫-L-二硫酸生物蝶呤 (6S)-Tetrahydro-L-biopterin Disulfate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬樣生長因子1(IGF-1)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit 96T/48T
(6S)-四氫-L-硫酸生物蝶呤 (6R)-Tetrahydro-L-biopterin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬樣生長因子2(IGF-2)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 96T/48T
四氫生物蝶呤(THB)二鹽酸 Tetrahydrobiopterin (THB) dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 96T/48T
鹽酸決奈達隆 Dronedarone HCl 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T
鹽酸決奈達隆-d6 Dronedarone-d6 HCl 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T
去丁基鹽酸決奈達隆-d6 Desbutyl Dronedarone-d6 HCl 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬脂聯(lián)素(ADP)ELISA檢測試劑盒Porcineadiponectin,ADPELISAKit 96T/48T
O-脫芳香基雷諾嗪 O-Desaryl Ranolazine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA檢測試劑盒swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISAKit 96T/48T
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。