產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3219 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
魯氏不動(dòng)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Acinetobacter lwoffiPCR | BKP3219 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:魯氏不動(dòng)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Sennoside B 128-57-4 中文名:番瀉苷B 分子式:C42H38O20 度:95.5% 關(guān)鍵詞: ; 狹葉番瀉葉; 蒽醌苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白elisa試劑盒 小鼠樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Sennoside A 81-27-6 中文名:番瀉苷A 分子式:C42H38O20 度:92.0% 關(guān)鍵詞: ; 狹葉番瀉葉; 蒽醌苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒、小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Senkyunolide S 172723-28-3 中文名: 分子式:C12H16O5 度:% 關(guān)鍵詞: 川芎; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠樣生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 小鼠樣生長(zhǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠樣生長(zhǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠樣生長(zhǎng)因子試劑盒、小鼠樣生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Senkyunolide R 172549-37-0 中文名: 分子式:C12H16O5 度:% 關(guān)鍵詞: 川芎; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒
Senkyunolide I 94596-28-8 中文名: 分子式:C12H16O4 度:94.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒
7-Oxo-β-sitosterol 2034-74-4 中文名:7-氧代-β-谷甾醇 分子式:C29H48O2 Rat vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒
Schleicheol 2 256445-68-8 中文名: 分子式:C30H52O2 Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Ikshusterol 3-O-glucoside 112137-81-2 中文名: 分子式:C35H60O7 Humancytokeratin18,CK-18ELISA試劑盒人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Cerevisterol 516-37-0 中文名:啤酒甾醇 分子式:C28H46O3 組織HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 14858-07-2 中文名: 分子式:C28H44O3 Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
魯氏不動(dòng)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)四雙酚A雙(2-羥乙基)醚(>93.0%(GC)) Tetrabromobisphenol A Bis(2-hydroxyethyl) Ether 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(GC) 英文名稱RatMaixmetalloproteinase-13—MMP-13ELISAkit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)規(guī)格:96T/48T
4,4'-(六氟異亞丙基)二酞酸酐(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 酵母菌SD-LEU/P培養(yǎng)基100毫升
3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T)) 3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(T) ELISAKitCA19-9人糖鏈抗原19-9規(guī)格:48T/96T
三環(huán)[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC)) Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠蛋白激酶Cε(PKCε)ELISA試劑盒 ,英文名: PKCε ELISA Kit
ε-己內(nèi)酯(>99.0%(GC)) ε-Caprolactone 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-thymocyteglobulin,ATGELISAKit 96T/48T
β-丙內(nèi)酯(>95.0%(GC)(T)) β-Propiolactone 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T) 大鼠腦啡肽(ENK)試劑盒 Rat enkephalin,ENK ELISA Kit
DL-丙交酯(>98.0%(T)) DL-Lactide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 英文名稱RatMaixmetalloproteinase-10—MMP-10ELISAkit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)規(guī)格:96T/48T
L-(-)-交酯(>98.0%(T)) L-(-)-Lactide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 酵母菌SD-LEU培養(yǎng)基100毫升
δ-戊內(nèi)酯(>98.0%(GC)) δ-Valerolactone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) ELISAKitGlyCAM-1人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子規(guī)格:48T/96T
1,3-雙(六氟-α-羥基異丙基)苯(>98.0%(GC)) 1,3-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA試劑盒 ,英文名: PKCδ ELISA Kit
9-苯基蒽(>98.0%(GC)) 9-Phenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: Hp-IgG ELISA Kit
N-苯基-9-蒽胺(>98.0%(GC)) N-Phenyl-9-anthramine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒 ,英文名: F-TESTO ELISA Kit
1-萘(>98.0%(GC)) 1-Iodonaphthalene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 ,英文名: FT4 ELISA Kit
苯并[a]蒽(>98.0%(GC)) Benz[a]anthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousefreefattyacids,FFAELISAKit 96T/48T
1H-環(huán)五[l]菲(>95.0%(GC)) 1H-Cyclopenta[l]phenanthrene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 ,英文名: FFA ELISA Kit
環(huán)戊[fg]并四苯-1,2-二酮 Cyclopenta[fg]tetracene-1,2-dione 質(zhì)量規(guī)格: 小鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit
二苯并[a,h]蒽(>95.0%(GC)) Dibenz[a,h]anthracene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 ,英文名: iNOS ELISA Kit
二苯并[b,def]芘(>98.0%(GC)) Dibenzo[b,def]chrysene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠誘導(dǎo)型合酶(NOS2)ELISA試劑盒 ,英文名: NOS2 ELISA Kit
1,2:8,9-二苯并五苯 1,2:8,9-Dibenzopentacene 質(zhì)量規(guī)格: 小鼠誘導(dǎo)型一氧化合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 ,英文名: iNOS ELISA Kit
二苯并[g,p]稠二萘(>98.0%(HPLC)) Dibenzo[g,p]chrysene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 小鼠原鈣黏素15(PCDH15)ELISA試劑盒 ,英文名: PCDH15 ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。