產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3230 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書 | Actinomyces pyogenesPCR | BKP3230 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Solvent Yellow 3 97-56-3 中文名:溶劑黃 分子式:C14H15N3 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISAKit
Solanesol 13190-97-1 中文名:茄尼醇 分子式:C45H74O 度:% 關(guān)鍵詞: 抗氧化; 抗菌; 煙草; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠c-fosELISAKit
prasterone sulfate 1099-87-2 中文名:去氫表雄酮硫酸鈉鹽 分子式:C19H27NaO5S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠氧化型(ox-HDL)ELISA試劑盒
cholate 361-09-1 中文名:膽酸鈉 分子式:C24H39NaO5 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 膽烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠氧化型(ox-LDL)ELISA試劑盒
Sitosteryl palmitate 2308-85-2 中文名:β-谷甾醇棕櫚酸酯 分子式:C45H80O2 度:90.0% 關(guān)鍵詞: 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠氧化抗體(OLAb)ELISA試劑盒
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 1265908-20-0 中文名: 分子式:C28H40O3 兔子堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Schleicheol 1 256445-66-6 中文名: 分子式:C30H52O2 Human thymus leukemia aigen (TLa) ELISA Kit 人胸腺抗原(TLa)ELISA試劑盒
Uzarigenin digitaloside 61217-80-9 中文名: 分子式:C30H46O8 Humanpunjecellaoaibody,PCA-1/YoELISAKit 人抗浦肯野細胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Daturametelin I 904667-65-8 中文名: 分子式:C34H48O10 humanEndothelin1,ET-1ELISA試劑盒人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6-O-Methylcerevisterol 126060-09-1 中文名: 分子式:C29H48O3 組織PKCδ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書二苯并-15-冠5-醚(>95.0%(GC)) Dibenzo-15-crown 5-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 大鼠N-乙?;?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA檢測試劑盒RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 96T/48T
二苯并-21-冠7-醚(>96.0%(GC)) Dibenzo-21-crown 7-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 人白介素11(IL-11)試劑盒 Human Ierleukin 11 ELISA KIT
4'-甲酰苯并-15-冠-5-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-15-crown 5-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱MouseacetylcholinereceptoraibodyELISAKit小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)規(guī)格:96T/48T
4'-甲酰苯并-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) PP2A蛋白共沉淀分析試劑盒5
4,7,13,21,24-六氧雜-1,10-二氮雜雙環(huán)[8,8,8]-二十六烷(>98.0%(GC)(T)) 4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) Rabbitadramycin,ADRELISA試劑盒兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-(羥甲基)-12-冠4-醚(>95.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-12-crown 4-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠(LDL)ELISA 試劑盒
2-(羥甲基)-15-冠5-醚(>96.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-15-crown 5-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) Rat urokinase (UK) ELISA Kit 大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒
2-(羥甲基)-18-冠6-醚(>93.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-18-crown 6-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(GC) HumanHerpessimplexvirusⅠaibody,HSVⅠ-AbELISAKit 人單病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷(>98.0%(T)) 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) HumanAspaateaminoansferase,GOT/GPTELISA試劑盒人天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷三鹽酸鹽(>98.0%(N)(T)) 1,4,7-Triazacyclononane Trihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)(T) 植物源性食品山核桃(pecan)試劑盒20
AV-951 Tivozanib, AV951 質(zhì)量規(guī)格:>98%,VEGFR抑制劑 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA檢測試劑盒MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 96T/48T
7,8-二氫生物蝶呤 7,8-Dihydro-L-biopterin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR 小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA檢測試劑盒MouseC-ReactiveProtein,CRPELISAKit 96T/48T
整形素 Chlorflurenol-methyl 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 小鼠C型尿肽(CNP)ELISA檢測試劑盒MouseC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 96T/48T
帕拉米韋三水合物 Peramivir Trihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠ELISA試劑盒
神經(jīng)保護劑NXY059 NXY-059,Cerovive 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA檢測試劑盒MouseE-Cadherin,E-CadELISAKit 96T/48T
L-犬尿氨酸(標準品) L-Kynurenine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA檢測試劑盒MouseE-SelectinELISAkit 96T/48T
磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基嘧啶 Sulfadimethoxine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA檢測試劑盒MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 96T/48T
磺胺二甲氧基嘧啶(標準品) Sulfadimethoxine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA檢測試劑盒MouseFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 96T/48T
奧斯他偉酸;奧司他韋羧酸 Oseltamivir acid 質(zhì)量規(guī)格:>97,BR 小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA檢測試劑盒MouseL-SelectinELISAkit 96T/48T
alpha-熊果苷(標準品) alpha-Arbutin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠N-乙?;?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA檢測試劑盒MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。