產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63502 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
賈第蟲PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63502 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
微量樣品DNA提取試劑盒 50T Androst-2-en-17-one 中文名:5α-雄甾-2-烯-17-酮 分子式:C19H28O 度:98.0%
微量二(MDA)測定試劑盒(TBA法) Polyhydroxybutyrate 26744-04-7 中文名:聚羥基丁酸酯 分子式:C12H20O7 度:% 關鍵詞: 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
微量二(MDA)測定試劑盒(TBA法) Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate 2099-26-5 中文名:雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 分子式:C23H34O4 度:98.0% 關鍵詞:
微量DNA凝膠回收試劑盒 50T Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate 1449-61-2 中文名:7-酮基去氫表雄酮醋酸酯 分子式:C21H28O4 度:98.0% 關鍵詞:
微晶纖維素 50g Androst-2-en-17-one 963-75-7 中文名:5α-雄甾-2-烯-17-酮 分子式:C19H28O 度:98.0% 關鍵詞:
Hs68(男性正常細胞) 5×106cells/瓶×2 變異鏈球菌碳酸鍶(>98%,BC)Strontium carbonate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)硫酸鍶(>98%,BC)Strontium sulfate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2'-甲氧基胞苷2’-OMe Cytidine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
低轉移細胞株;PC-3M-2B4N2-異丁?;B苷一水合物ibu-rG質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
FO細胞,*瘤細胞 胚肝二倍體細胞,CCC-HEL-1細胞 CL-0208SH-SY5Y(神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2N4-苯甲酰胞苷Bz-rC質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
F11 Others Human
F11 / FXI 細胞裂解液 (陽性對照) 羥基1灰石Hydroxyapatite質(zhì)量規(guī)格:>99%,粒徑20nm
上皮細胞生長添加物-2EpiCGS-2羥丙基甲基纖維素(粘度11250-21000mPas)Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M質(zhì)量規(guī)格:粘度11250-21000mPas
CTNNB1 Others Human beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羥丙基甲基纖維素Hydroxypropylmethylcellulose質(zhì)量規(guī)格:粘度55 - 60 mPa.s
細胞;DU 145 [DU145;DU-145]羥丙基甲基纖維素(30000 mpa.s)HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose質(zhì)量規(guī)格:30000 mpa.s,BR
S-180細胞,腹水瘤細胞 細胞,CRL-2780細胞
非洲綠猴腎細胞;VERO羥丙基甲基纖維素(4000mpas)HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose質(zhì)量規(guī)格:粘度K4m,4000 mpa.s
5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S 度:98.0% 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Acyclovir 中文名:阿昔洛韋 分子式:5O3 度:99.0% 小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-Aminobenzophenone 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO 度:99.0% 小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
N-Acetylcaprolactam 中文名:N-乙酰己內(nèi)酰胺 分子式:C8H13NO2 度:98.0% 小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-Aminoantipyrine 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O 度:99.0% 小鼠緊張素轉化酶(ACE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR