產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3235 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
嗜水氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Aeromonas hydrophilaPCR | BKP3235 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:嗜水氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Stanozolol 中文名:康力龍 分子式:C21H32N2O 度:98.0% 小鼠N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒
Oxymetholone 中文名:康復(fù)龍 分子式:C21H32O3 度:98.0% 小鼠NOD樣受體-2(NOD-2)ELISA試劑盒
Mebendazole 中文名:甲苯咪唑 分子式:C16H13N3O3 度:98.0% 小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒
8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid 中文名:喹方 分子式:C9H6INO4S 度:98.0% 小鼠L苯解酶(PAL)ELISA試劑盒
Ornidazole 中文名:奧硝唑 分子式:C7H10ClN3O3 度:98.0% 小鼠KN-62ELISA試劑盒
Estrone 53-16-7 中文名:雌酮 分子式:C18H22O2 HumanPepsin,PPELISAKit人胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Cynatratoside A 97399-96-7 中文名:白薇苷A 分子式:C28H40O8 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Sprengerinin A 88866-99-3 中文名: 分子式:C38H60O12 Human signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒
Sprengerinin C 88861-91-0 中文名: 分子式:C44H70O16 Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/ai-RA33-aibody,hNP/RA33ELISAKit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Prosapogenin A 19057-67-1 中文名:薯蕷次皂苷A 分子式:C39H62O12 Humanendomorphin-2,EM-2ELISA試劑盒人內(nèi)肽-2(EM-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
嗜水氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)5-硝基吲哚(>98.0%(GC)) 5-Nitroindole 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) Rabbitacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋁酞菁(>98.0%(T)) Phthalocyanine Chloroaluminum 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒
酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T)) Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) Rat Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
酞菁(>93.0%(N)) Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N) humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
顏料藍(lán)15,酞菁藍(lán)B Pigment Blue 15 質(zhì)量規(guī)格: HumanarylsulfataseA,ASAELISA試劑盒人芳基酯酶A(ASA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
顏料綠 7 Pigment Green 7 質(zhì)量規(guī)格: 植物源性食品開(kāi)心果(Pistachio)試劑盒20
酞菁鉛(II)(>95.0%(T)) Lead(II) Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) HumahymosinELISAKit人胸腺肽(Thymosin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酞菁鋅(>95.0%(T)) Zinc Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 小鼠低氧誘導(dǎo)因子2α(HIF2α)ELISA試劑盒 ,英文名: HIF2α ELISA Kit
酞菁鐵(II)(>95.0%(T)) Iron(II) Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA檢測(cè)試劑盒HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit 96T/48T
酞菁二鈉 Di Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格: 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒 Rat Gelsolin ELISA Kit
BOC-L-天冬氨酸 Boc-Asp-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人激肽釋放酶8(KLK 8)試劑盒 Human Kallikrein 8,KLK 8 ELISA Kit
BOC-L-谷氨酸 Boc-L-Glutamic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人極(VLDL)試劑盒 Human very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit
BOC-L-亮氨酸 Boc-Leu-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人極受體(VLDLR)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanverylowdensitylipoproteieceptor,VLDLRELISAKit 96T/48T
N-叔丁氧羰基-L-甲硫氨酸 BOC-L-Mine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)試劑盒 human collectin sub-family member 11,COLEC11 ELISA Kit
BOC-L-絲氨酸 N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-serine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人幾丁質(zhì)酶1(殼三糖酶)(CHIT1)試劑盒 Human chitinase 1 (chitoiosidase),CHIT1 ELISA kit
BOC-L-纈氨酸 Boc-Val-OH 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人幾丁質(zhì)酶3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)試劑盒 Human Chitinase-3-like Protein 1,YKL-40/CHI3L1 ELISA Kit
BOC-L-天冬酰胺 Boc-Asn-OH 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR 人己糖激酶(HK)試劑盒 Human Hexokinase,HK ELISA Kit
Boc-L-谷氨酰胺 Boc-Gln-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人己糖激酶3(HK3)試劑盒 human hexokinase 3,HK3 ELISA Kit
Boc-L-丙氨酸 N-丁二酯 Boc-Ala-OSu 質(zhì)量規(guī)格:BR 人病毒(PV)抗體(IgG)試劑盒 Human Poliomyelitis Virus(PV) aibody IgG ELISA Kit
BOC-D-丙氨酸 Boc-D-Ala-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人病毒抗原(PV)試劑盒 Human Poliomyelitis Virus aigen ELISA Kit