產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3236 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Aeromonas punctataPCR | BKP3236 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Stauntosaponin A 1417887-91-2 中文名: 分子式:C28H38O7 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠(NO)ELISAKit
Stanozolol 10418-03-8 中文名:康力龍 分子式:C21H32N2O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit
Stanolone 521-18-6 中文名:雄諾龍 分子式:C19H30O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit
Sprengerinin C 88861-91-0 中文名: 分子式:C44H70O16 度:98.0% 關(guān)鍵詞: ; 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠疊氮胸苷(AZT)ELISAKit
Sprengerinin A 88866-99-3 中文名: 分子式:C38H60O12 度:% 關(guān)鍵詞: 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠氧化型谷胱甘肽elisa試劑盒 小鼠氧化型谷胱甘肽試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠氧化型谷胱甘肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠氧化型谷胱甘肽試劑盒、小鼠氧化型谷胱甘肽elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Glaucogenin C mono-D-thevetoside 849201-84-9 中文名: 分子式:C28H40O9 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
17α-Estradiol 57-91-0 中文名:17α-雌二醇 分子式:C18H24O2 Human signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒
Stauntosaponin A 1417887-91-2 中文名: 分子式:C28H38O7 Humanai-Qfeveraibody,ai-Q-AbELISAKit 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Ergosta-7,22-dien-3-one 32507-77-0 中文名:麥角甾-7,22-二烯-3-酮 分子式:C28H44O HumanEndomeiumAibody,EMAbELISA試劑盒人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Estradiol 50-28-2 中文名:雌二醇 分子式:C18H24O2 組織PKA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測試劑盒價(jià)格(R)-(-)-2-辛醇(>98.0%(GC)) (R)-(-)-2-Octanol 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA檢測試劑盒Humancardiacisoformofopni,cELISAKit 96T/48T
(R)-(+)-1-苯乙醇(>98.0%(GC)) (R)-(+)-1-Phenylethyl Alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 大鼠凝血酶抗凝血酶Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)試劑盒 Rat thrombin-aithrombin III complex,TAT-III ELISA Kit
(S)-(-)-1-苯乙醇(>98.0%(GC)) (S)-(-)-1-Phenylethyl Alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱RatThyroid-PeroxidaseELISAKit大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1--4-(三氟甲氧基)苯(>97.0%(GC)) 1-Bromo-4-(trifluoromethoxy)benzene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 酵母谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX)活性比色法定量檢測試劑盒20
4-丁基-4'-羥基查耳酮(>98.0%(HPLC)) 4-Butyl-4'-hydroxychalcone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) ELISAKitCP/CER人銅藍(lán)蛋白規(guī)格:48T/96T
2-羥基查耳酮(>98.0%(GC)(T)) 2-Hydroxychalcone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 小鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒 ,英文名: Resistin ELISA Kit
2'-羥基查耳酮(>98.0%(HPLC)) 2'-Hydroxychalcone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA檢測試劑盒Rat26Sproteasome,26SPSMELISAKit 96T/48T
4-二甲基氨基-4'-硝基茋(>98.0%(HPLC)(T)) 4-Dimethylamino-4'-nitrostilbene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 人白介素-12受體(IL-12R)試劑盒 Human Ierleukin 12 receptor,IL-12R ELISA kit
4-甲氧基-4'-硝基芪(>98.0%(GC)) 4-Methoxy-4'-nitrostilbene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱MouseinhibinBELISAKit小鼠抑制素B(INHB0規(guī)格:96T/48T
5-硝基尿嘧啶(>99.0%(HPLC)(T)) 5-Nitrouracil 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T) PI復(fù)染試劑盒50
BOC-β-丙氨酸 Boc-?-Ala-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)試劑盒 Human methyl CpG binding protein 2,MECP2 ELISA Kit
(R)-N-BOC-3-代丙氨酸甲酯 Boc-?-iodo-Ala-OMe 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人甲基化DNA[蛋白]半胱氨酸S甲基轉(zhuǎn)移酶試劑盒 Human methylated-DNA--protein-cysteine S-methylansferase ELISA Kit
BOC-D-精氨酸鹽酸鹽 Boc-Arg-OH·HCl·H2O 質(zhì)量規(guī)格:BR 人甲肟素D2(PGD2-MOX)試劑盒 human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT
Nα-BOC-D-精氨酸鹽酸鹽一水合物 Nalpha-BOC-D-Arginine hydrochloride hydrate 質(zhì)量規(guī)格:BR 人甲酰甲硫氨酸(fMet)ELISA檢測試劑盒Humanformylmine,fMetELISAKit 96T/48T
Boc-Arg(Mts)-OH·CHA Boc-Arg(Mts)-OH·CHA 質(zhì)量規(guī)格:BR 人甲酰甲硫氨酸(fMet)試劑盒 Human formylmine,fMet ELISA Kit
BOC-硝基-L-精氨酸 Boc-Arg(NO2)-OH 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒 human Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit
叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天門冬酰胺 Boc-N-beta-Trityl-L-asparagine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗體試劑盒 Human PTH 1-34 aibody ELISA Kit
N-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基 -L-天門冬酰胺 Boc-Asn-(Xan)-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)試劑盒 Human Parathyroid hormone1-34,PTH 1-34 ELISA Kit
Boc-L-天冬氨酸 4-芐酯 Boc-L-Asp(OBzl)-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人甲狀旁腺激素1受體(PTH1R)試劑盒 Human Parathyroid Pormone 1 Receptor,PTH1R ELISA Kit
Boc-L-天冬氨酸 4-環(huán)己酯 Boc-L-Asp(OcHex)OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。