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【產(chǎn)品名稱】: 牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Akabane Disease Virus(ADV)RTPCR
【貨號】: BKP3246

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

Stigmasterol glucoside  19716-26-8  中文名：  分子式：C35H58O6    組織PKC激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Stigmastane-3,6-diol  112244-29-8  中文名：  分子式：C29H52O2    HumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人病毒IgGELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名：  分子式：C36H56O13    兔子基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

α-Spinasterol acetate  4651-46-1  中文名：α-菠甾醇乙酸酯  分子式：C31H50O2    Human thymosin alpha 1 (Thymosin alpha 1) ELISA Kit 人胸腺肽α1(Thymosin α1)ELISA試劑盒

α-Spinasterol glucoside  1745-36-4  中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6    Human28SribosomeRNPaibody,28SrRNPELISAKit 人28S抗核糖體抗體(28SrRNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Danshenxinkun A  65907-75-7  中文名：丹參新醌甲  分子式：C18H16O4    組織PAR1Bα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Przewaquinone A  76843-23-7  中文名：紫丹參甲素  分子式：C19H18O4    HumanPerforin/Pore-formingprotein，PF/PFPELISAKit人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Deoxyneocryptotanshinone  27468-20-8  中文名：  分子式：C19H22O3    兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

甾體              Human cardiac myosin light chain 1 (CMLC-1) ELISA Kit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒

Pregn-5-ene-3β,17α,20S-triol  903-67-3  中文名：  分子式：C21H34O3    Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-AbELISAKit 人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
異蒽酮紫  Isoviolanthrone  質(zhì)量規(guī)格： 英文名稱RatCTELISAKit大鼠降鈣素(CT)規(guī)格：96T/48T

2-甲基環(huán)戊[I]菲(>97.0%(GC))  2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) 酵母β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性熒光定量檢測試劑盒20

萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC))  Naphtho[2,3-a]pyrene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) ELISAKitDP人脫氧尿三0酸規(guī)格：48T/96T

2-氯吩噻嗪(>98.0%(GC))  2-Chlorophenothiazine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 小鼠毒蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)ELISA試劑盒 ，英文名： CHRM2 ELISA Kit

2-氯-4,6-二苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))  2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA檢測試劑盒HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit 96T/48T

陰丹酮  Indanthrone  質(zhì)量規(guī)格： 大鼠凝血因子IX(FIX)試劑盒 Rat Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA Kit

久洛尼定(>97.0%(GC)(T))  Julolidine  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T) 英文名稱RatCTELISAKit大鼠降鈣素(CT)規(guī)格：96T/48T

9-醛基久洛尼定(>98.0%(GC))  9-Julolidinecarboxaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 酵母超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20

9,10-菲醌(>99.0%(GC))  9,10-Phenanthrenequinone  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) ELISAKitDPD人脫氧膠原交聯(lián)規(guī)格：48T/96T

菲啶(>98.0%(GC))  Phenanthridine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 小鼠毒蕈鹼乙酰膽堿受體M2(CHRM2)ELISA試劑盒 ，英文名： CHRM2 ELISA Kit
牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒說明書DL-丙氨酸  DL-Alanine  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 人骨成型蛋白7(BMP-7)試劑盒 Human BMP-7 ELISA Kit

DL-酪氨酸  DL-Tyrosine  質(zhì)量規(guī)格：0.98 人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒 Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit

DL-甲硫氨酸;蛋氨酸  DL-Mine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit

DL-天冬氨酸  DL-Aspartic acid  質(zhì)量規(guī)格：0.98 人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)試劑盒 Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit

DL-谷氨酰胺  DL-Glutamine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人骨堿性0酸酶(BALP)試劑盒 Human bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit

DL-脯氨酸  DL-Proline  質(zhì)量規(guī)格：0.99 人骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒 Human Crosslaps,Cr ELISA Kit

DL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽  DL-Alanine methyl ester hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：0.98 人骨膜蛋白/成骨細(xì)胞特異性因子2(POSTN)試劑盒 Human periostin/osteoblast specific factor 2,POSTN ELISA kit

L-谷氨酸5乙酯  H-Glu(OEt)-OH  質(zhì)量規(guī)格：0.985 人骨橋素(OPN)試劑盒 Human Osteopoin,OPN ELISA Kit

N-乙酰-DL-亮氨酸  N-Acetyl-DL-leucine   質(zhì)量規(guī)格：0.98 人因子1(MPIF-1/CCL23)試劑盒 Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 ELISA Kit

N-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸  N6-Cbz-L-Lysine  質(zhì)量規(guī)格：98%，BR 人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit
PCR檢測試劑盒

牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。