產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3251 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
奧爾帕瓦約病毒PCR檢測試劑盒供應 | Allpaahuayo virus(ALLV)RTPCR | BKP3251 |
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:奧爾帕瓦約病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Sulfaguanidine 中文名:磺胺脒 分子式:C7H10N4O2S 脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白 (FABP4) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Sulfadiazine 中文名:磺胺嘧啶 分子式:C10H10N4O2S 凋亡相關(guān)因子 (Fas/Apo-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Sulfaclozine 中文名:磺胺氯吡嗪 分子式:C10H9ClN4O2S 凋亡相關(guān)因子配體 (Fas-L) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Sucrose 中文名: 分子式:C12H22O11 胎球蛋白 -A(Fetuin-A) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Succinic acid 中文名: 分子式:C4H6O4 脂褐質(zhì)測試盒 Lipfuscin test box
Dihydrotanshinone I 87205-99-0 中文名: 分子式:C18H14O3 Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISA試劑盒人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tanshinone IIB 17397-93-2 中文名:丹參酮IIB 分子式:C19H18O4 組織N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Tanshinone I 568-73-0 中文名: 分子式:C18H12O3 humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit人0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Neoprzewaquinone A 630057-39-5 中文名: 分子式:C36H28O6 兔子球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Cryptotanshinone 35825-57-1 中文名:隱丹參酮 分子式:C19H20O3 People leils binding type AFP / AFP Varia 3 (AFP-L3) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒E
奧爾帕瓦約病毒PCR檢測試劑盒供應2,5-雙(4-氨苯基)-1,3,4-惡二唑(>98.0%(HPLC)) 2,5-Bis(4-aminophenyl)-1,3,4-oxadiazole 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA檢測試劑盒RatHomocysteicacid,HcyELISAKit 96T/48T
2-(2-羥苯基)苯并惡唑(>98.0%(GC)(T)) 2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 人白介素19(IL-19)試劑盒 Human IL-19 ELISA Kit
5,6-二-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC)) 5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱MousePCNAELISAKit小鼠增殖細胞抗原(PCNA)規(guī)格:96T/48T
2-(2-羥苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T)) 2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) PH7-8顯色(PHENOLRED)指示溶液50毫升
1-氨基芘(>98.0%(HPLC)(T)) 1-Aminopyrene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISA試劑盒豬內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1-芘(>94.0%(GC)) 1-Bromopyrene 質(zhì)量規(guī)格:>94.0%(GC) 小鼠多巴胺(DA)ELISA 試劑盒
4-芘(>95.0%(GC)) 4-Bromopyrene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) Rat visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒
1,6-二氨基芘(>98.0%(HPLC)(N)) 1,6-Diaminopyrene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N) HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 人素A2(TX-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
1,3-二氨基芘 1,3-Diaminopyrene 質(zhì)量規(guī)格: HumanAquaporin3,AQP-3ELISA試劑盒人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,7-二叔丁基芘(>98.0%(GC)) 2,7-Di-tert-butylpyrene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 植物乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒20
DL-組氨酸 DL-Histidine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人胱抑素F(CST7)試劑盒 Human Cystatin-F,CST7 ELISA kit
DL-組氨酸鹽酸鹽 DL-Histidine·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,一水物,BR 人胱抑素SN(CST1)試劑盒 Human Cystatin-SN,CST1 ELISA kit
DL-高苯丙氨酸 DL-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人廣譜細胞角蛋白(P-CK)ELISA檢測試劑盒Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 96T/48T
DL-高絲氨酸 DL-Homoserine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人廣譜細胞角蛋白(P-CK)試劑盒 Human pan-cytokeratin,P-CK ELISA Kit
克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸 Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,MET抑制劑 人廣州管園線蟲抗體(IgG)試劑盒 Human ai-angiosongylus caonensis aibody IgG ELISA Kit
DL-賴氨酸鹽酸鹽 DL-Lysine·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人廣州管園線蟲抗體(IgM)試劑盒 Human ai-angiosongylus caonensis aibody IgM ELISA Kit
DL-正纈氨酸 DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人果糖胺(FRA)試劑盒 Human fructosamin,FRA ELISA kit
DL-正纈氨酸 DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格:0.99 人果糖二0酸縮酶A(ALDOA)試劑盒 Human ALDOA ELISA kit
DL-焦谷氨酸 DL-Pyroglutamic acid 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人過氧化氫酶(CAT)試劑盒 Human Catalase,CAT ELISA kit
DL-叔亮氨酸 DL-tert-Leucine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)試劑盒 Human PPARGC1 ELISA Kit
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。