產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3260 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
無漿體通用PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Anaplasma spp.PCR | BKP3260 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:無漿體通用PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Taxilluside A 1661914-46-0 中文名: 分子式:C18H24O10 Humancytovillin/ezrin,CVLELISA試劑盒人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
n-Butyl β-D-fructofuranoside 80971-60-4 中文名:基-β-D-果糖苷 分子式:C10H20O6 組織INSULI激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Palmitone 502-73-8 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O Humanplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 54232-58-5 中文名: 分子式:C18H30O3 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Acetylatractylodinol 61582-39-6 中文名:乙酰蒼術(shù)素醇 分子式:C15H12O3 Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒
Rhein 478-43-3 中文名:大黃酸 分子式:C15H8O6 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Methylanthraquinone 84-54-8 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 Human adenosine three phosphate binding cassette anspoer A1 (ABCA1) ELISA Kit 人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
1-Hydroxy-2-methylanthraquinone 6268/9/3 中文名:1-羥基-2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O3 Humanypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Anthraglycoside B 23313-21-5 中文名:大黃素-8-O-葡萄糖苷 分子式:C21H20O10 HumanDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Torososide A 165689-32-7 中文名: 分子式:C38H32O15 組織NAD依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒20次
無漿體通用PCR檢測試劑盒價(jià)格5,10-二氫-5,10-二甲基吩嗪(>98.0%(GC)(N)) 5,10-Dihydro-5,10-dimethylphenazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) 人?;碳さ鞍?/span>(ASP)ELISA檢測試劑盒HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 96T/48T
雙(羰基二硫代)四硫富瓦烯(>95.0%(W)) Bis(carbonyldithio)tetrathiafulvalene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(W) 大鼠素E2(PGE2)試劑盒 Rat Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit
1,2-苯二硫醇(>95.0%(GC)) 1,2-Benzenedithiol 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 英文名稱RatTG-AbELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(TG-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4,5-雙(甲硫代)-1,3-二硫醇-2-酮(>98.0%(GC)) 4,5-Bis(methylthio)-1,3-dithiol-2-one 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 膠原酶潛酶活化劑(APMA)500微升
二巰基馬來腈二鈉(>90.0%(N)) Di Dimercaptomaleonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(N) ELISAKitVD人維生素D規(guī)格:48T/96T
4,5-亞乙基二硫代-1,3-二硫醇-2-硫酮(>98.0%(GC)) 4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiole-2-thione 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠多萜長醇二0酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶(DDOST/OST-48)ELISA試劑盒 ,英文名: DDOST/OST-48 ELISA Kit
4,5-乙撐二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC)) 4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 大鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA檢測試劑盒RatCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 96T/48T
4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC)) 4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC) 人白介素1β前體(pro-IL1B)試劑盒 Human pro ierleukin 1 beta,pro-IL1B ELISA Kit
3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC)) 3,3'-Bithiophene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱MouseLaminaPropriaLymphocyteELISAKit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)規(guī)格:96T/48T
2,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC)) 2,1,3-Benzothiadiazole 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) PH4-5顯色(BROMOCRESOLGREEN)指示溶液50毫升
D-酪氨酸 D-Tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒 Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA kit
D-組氨酸 D-Histidine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人剛地弓形蟲(T.gondii)試劑盒 Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit
D-丙氨酸甲酯鹽酸鹽 D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人高半胱氨酸(Hcy)試劑盒 Human Homocysteine,HCY ELISA Kit
D-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽 D-Alanine tert-Butyl Ester Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.99 人高爾基蛋白73(GP-73)試劑盒 Human GP-73 ELISA Kit
D-精氨酸 D-Arginine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人高爾基體抗體(AGAA)試劑盒 Human ai-golgi apparatus aibody,AGAA ELISA Kit
非對稱二甲基精氨酸 ADMA 質(zhì)量規(guī)格:>98%,鹽酸鹽形式,美國進(jìn)口 人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)ELISA檢測試劑盒HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 96T/48T
N'-硝基-D-精氨酸 N'-Nitro-D-arginine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒 Human cytokeratin High Molecular Weight,CK-HMW ELISA Kit
D-天冬酰胺,一水 D-Asparagine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:0.99 人高分子量脂聯(lián)素(HMW Adiponectin)試劑盒 Human High Molecular Weight Adiponectin,HMW Adiponectin ELISA Kit
D-天冬氨酸 D-Aspartic acid 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒 human ulasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit
D-天冬氨酸4-叔丁酯 D-Aspartic acid 4-tert-butyl ester 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人(HDL)ELISA檢測試劑盒HumanHighdensitylipoprotein,HDLELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。