產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3267 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
溶血隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Arcanobacterium haemolyticumPCR | BKP3267 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Tenacigenoside A 中文名: 分子式:C35H56O12 度:% 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒
Daturataturin A aglycone 中文名: 分子式:C28H38O5 度:93.0% 兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒
6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O2 度:% 兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
Oleandrin 中文名: 分子式:C32H48O9 度:98.0% 兔內(nèi)皮素(Endothelin-1)ELISA試劑盒
β-Anhydrouzarigenin 中文名: 分子式:C23H32O3 度:97.0% 兔內(nèi)皮抑素(rabbit ES) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
9,16-Dioxo-10,12,14-octadecatrienoic acid 217810-46-3 中文名: 分子式:C18H26O4 Rat thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 大鼠前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
11-Hydroxyjasmonic acid 140447-14-9 中文名: 分子式:C12H18O4 Humanai-glycoproteinaibody,GPELISAKit 人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Soyacerebroside II 115074-93-6 中文名:大豆腦苷II 分子式:C40H75NO9 humandihydropyrimidinase-like3,DPYSL3ELISA試劑盒人二氫嘧啶酶樣3(DPYSL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Sucrose 57-50-1 中文名: 分子式:C12H22O11 組織MUSK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
5-Hydroxymethylfurfural 67-47-0 中文名:5-羥甲基糠醛 分子式:C6H6O3 Humanphospholamban,PLNELISAKit人受0蛋白(PLN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
溶血隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)玉米烯酮(>98% (HPLC),BC) Zearalenone from Giberella zeae 質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BC 英文名稱RatAT-IIIELISAKit大鼠抗凝血酶(AT-III)規(guī)格:96T/48T
堿式碳酸鋅 Zinc carbonate basic 質(zhì)量規(guī)格:BR 簡(jiǎn)單細(xì)菌酚品紅染色試劑盒50
硬脂酸鋅 Zinc distearate 質(zhì)量規(guī)格:BR ELISAKitVK1人維生素K1規(guī)格:48T/96T
氫氧化鋅(>98%,BR) Zinc hydroxide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙?;?/span>(DLAT)ELISA試劑盒 ,英文名: DLAT ELISA Kit
化鋅(>98%,BC) Zinc iodide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 人復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA檢測(cè)試劑盒HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 96T/48T
鋅四水(>98%,BR) Zinc phosphate tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠素F2α受體(PTGFR)試劑盒 Rat Prostaglandin F2-alpha receptor,PTGFR ELISA kit
硫化鋅(>98%, Ind Grade) Zinc sulfide 質(zhì)量規(guī)格:>98%, Ind Grade 英文名稱RatAT-IIIELISAKit大鼠抗凝血酶(AT-III)規(guī)格:96T/48T
氧化鋯(>98%,BC) Zirconium (IV) oxide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 簡(jiǎn)單細(xì)菌甲基藍(lán)染色試劑盒50
氯氧化鋯八水(>98%,BC) Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC ELISAKitVE人維生素E規(guī)格:48T/96T
氫氧化鋯 Zirconium hydroxide hydrate 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)ELISA試劑盒 ,英文名: DLD ELISA Kit
ENTβH貝殼杉烷,二羧酸 HPLC≥98% 5mg Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豨薟醚酸 HPLC≥98% 5mg Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
entα二羥基貝殼杉烷羧酸 HPLC≥98% 5mg Mouselipoproteinlipase,LPLELISA試劑盒小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
enta,,三羥基貝殼杉烷羧酸 HPLC≥98% 5mg Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
五味子酮 HPLC≥98% 10mg Mouselipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
苦豆堿 HPLC≥98% 20mg MouseL-phenylalanine,LPAELISA試劑盒小鼠苯氨酸(LPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
番石榴苷 HPLC≥98% 20mg MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
牛扁堿 HPLC≥98% 20mg MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISA試劑盒小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
絞股藍(lán)皂苷XLVI HPLC≥97% 20mg MouseL-SelectinELISAKit小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
金盞花苷E;去葡萄糖竹節(jié)參皂苷 HPLC≥98% 20mg MouseL-SelectinELISA試劑盒小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:溶血隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。