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【產(chǎn)品名稱】: 禽腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書
【英文名稱】: Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)RTPCR
【貨號(hào)】: BKP3282

【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

禽腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

Thiamphenicol  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S  度：98.0%  豚鼠組胺(HIS)ELISAKit  

Fenbendazole  中文名：芬苯達(dá)唑  分子式：C15H13N3O2S  度：98.0%  豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISAKit  

  中文名：利多卡因  分子式：C14H22N2O  度：98.0%  豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISAKit              

Mepivacaine  中文名：甲哌卡因  分子式：C15H22N2O  度：98.0%  豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISAKit  

4-Acetamidophenol  中文名：對(duì)乙酰氨基酚  分子式：C8H9NO2  度：98.0%  豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit
Tokinolide B  112966-16-2  中文名：  分子式：C24H28O4    組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次

Methyl 4-O-feruloylquinate  195723-10-5  中文名：  分子式：C18H22O9    HumanPlacealalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit人胎盤堿性0酸酶(PLAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Trehalose  99-20-7  中文名：海藻糖  分子式：C12H22O11    兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Chlorogenic acid  327-97-9  中文名：綠原酸  分子式：C16H18O9    Human plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒

Ethyl rutinoside  187539-57-7  中文名：蕓香糖乙苷  分子式：C14H26O10    HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
二氫錳(>98%,BR)  Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 英文名稱RatPhosphoinositide-3kinaseELISAKit大鼠0脂酰肌醇三羥基激酶(PI3K)規(guī)格：96T/48T

松三糖單水；D-(+)-松三糖一水  Melezitose monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(zymography)電泳分析試劑盒5

縮節(jié)胺(植物激素級(jí))  Mepiquat chloride  質(zhì)量規(guī)格：>97%,植物激素級(jí) ELISAKitPeosidine人戊糖素規(guī)格：48T/96T

偏(>38%(HPO3),BR)  Metaphosphoric acid  質(zhì)量規(guī)格：>38%(HPO3),BR 小鼠防御素α5(DEFα5)ELISA試劑盒 ，英文名： DEFα5 ELISA Kit

肉桂酸甲酯(>98%,BR)  Methyl cinnamate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人抑制酸性蛋白(IAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 96T/48T

二氫酮酸甲酯(植物激素級(jí))  Methyl dihydrojasmonate  質(zhì)量規(guī)格：>90%,植物激素級(jí) 大鼠去乙酰化饑餓激素(dGHRL)試劑盒 Rat deacylated appetite-regulating hormone,dGHRL ELISA kit

吲哚-4-羧酸甲酯(>98%，BR)  Methyl indole-4-carboxylate  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 英文名稱RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)規(guī)格：96T/48T

甲基綠(~65%,BS)  Methylene green zinc chloride double salt  質(zhì)量規(guī)格：~65%,BS 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)羧甲基轉(zhuǎn)鐵蛋白(CMansferrin-zymography電泳分析試劑盒(MMP7)5

亞甲紫3RAX(>90%，BS)  Methylene violet 3RAX  質(zhì)量規(guī)格：>90%，BS ELISAKitACO-2人烏頭酸酶2規(guī)格：48T/96T

2-甲基琥珀酸(>98%,BR)  Methylsuccinic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠防御素α1(DEFα1)ELISA試劑盒 ，英文名： DEFα1 ELISA Kit
禽腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書L-胱氨酸鹽酸鹽  L-Cystine hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人鵝膏蕈堿試劑盒 Human Amanitin ELISA Kit

L-半胱氨酸  L-Cysteine  質(zhì)量規(guī)格：含量98~101%,BR 人兒茶酚胺(CA)試劑盒 Human catecholamine,CA ELISA Kit

L-半胱氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  L-Cysteine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人兒茶酚抑素試劑盒 Human catestatin ELISA Kit

L-半胱氨酸鹽酸鹽，一水  L-Cysteine hydrochloride monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人二(MDA)試劑盒 Human Malondialdehyde,MDA ELISA Kit

DL-半胱氨酸  DL-Cysteine   質(zhì)量規(guī)格：>97%,易氧化 人二0酸尿核苷葡糖酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4(UGT2B4)試劑盒 Human uridine dipho-sphate glucuronosylansferase 2 family polypeptide B4,UGT2B4 ELISA Kit

L-組氨酸  L-Histidine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人二0酸腺苷(ADP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAdenosinediphosphate,ADPELISAKit 96T/48T

L-丙氨酸  L-Alanine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人二0酸腺苷(ADP)試劑盒 Human adenosine diphosphate,ADP ELISA kit

L-酪氨酸  L-Tyrosine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人二羥基賴正己氨酸(DHLNL)試劑盒 Hurman dihydroxylysinonorleucine,DHLNL ELISA kit

L-酪氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  L-Tyrosine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)試劑盒 human dihydropyrimidinase-like 2,DPYSL2 ELISA Kit

L-谷氨酸  L-Glutamic acid  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人二氫嘧啶酶樣3(DPYSL3)試劑盒 human dihydropyrimidinase-like 3,DPYSL3 ELISA Kit
PCR檢測(cè)試劑盒

禽腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。