產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3283 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
禽病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Avian Hepatitis E Virus(aHEV)RTPCR | BKP3283 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:禽病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Tiamulin 55297-95-5 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S 度:98.0% 小鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISAKit
Tiagabine hydrochloride 145821-59-6 中文名:鹽酸噻加賓 分子式:C20H26ClNO2S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISAKit
Thiamphenicol 15318-45-3 中文名:甲砜霉素 分子式:C12H15Cl2NO5S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒
Thevetin B 27127-79-3 中文名: 分子式:C42H66O18 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒
Thevebioside 114586-47-9 中文名: 分子式:C36H56O13 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒
Senkyunolide C 91652-78-7 中文名:洋川芎內(nèi)酯C 分子式:C12H12O3 Humanplacealprotein,PPELISAKit人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Docosanoic acid 112-85-6 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2 兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Pilosol A 501086-15-3 中文名: 分子式:C13H12O Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒
Glycerol 56-81-5 中文名:甘油 分子式:C3H8O3 HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Riligustilide 89354-45-0 中文名: 分子式:C24H28O4 Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
禽病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)物質(zhì)P(1-9) Substance P (1-9) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PorcineTestoterone,TELISA試劑盒豬睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
物質(zhì)P(7-11) Substance P (7-11) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠防御素β2(DEFβ2)ELISA試劑盒 ,英文名: DEFβ2 ELISA Kit
TA-0910,他替瑞林 TA-0910, taltirelin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandynamin2,DNM2ELISAKit 96T/48T
素,游離酸 TRH, Free Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠固酮(ALD)試劑盒 Rat aldosterone,ALD ELISA Kit
尿皮質(zhì)激素Ⅲ,小鼠 Urocortin III, mouse 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱RatPhosphoinositide-3kinaseELISAKit大鼠0脂酰肌醇三羥基激酶(PI3K)規(guī)格:96T/48T
纈絡(luò)肽(VQY),豬 Valosin Peptide (VQY),porcine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析試劑盒(MMP2/9)5/10
活性腸肽 Vasoactive Intestinal peptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitHEV-IgG人病毒IgG規(guī)格:48T/96T
Z-Ala-Ala-Leu-pNA Z-Ala-Ala-Leu-pNA 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠防御素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒 ,英文名: DEFβ1 ELISA Kit
三亞甲基碳酸酯 TMC 質(zhì)量規(guī)格: 度≥99% 人蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanGliadinIgAELISAKit 96T/48T
碳酸錳(>98%,BR) Manganese (II) carbonate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒 Rat iact Parathormone,i-PTH ELISA Kit
L-焦谷氨酸;氧脯氨酸 H-Pyr-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)試劑盒 Human NSA2 ELISA Kit
CBZ-L-焦谷氨酸 Z-Pyr-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人核心蛋白聚糖(DCN)試劑盒 Human Decorin/Bone proteoglycan II,DCN ELISA Kit
DL-m-酪氨酸 DL-m-Tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人核心結(jié)合因子α1,CBFA1/RUNX2 試劑盒 Human Core Binding Factor alpha1 CBFA1/RUNX2 ELISA Kit
肌氨酸甲酯鹽酸鹽 H-Sar-OMe·HCl 質(zhì)量規(guī)格:BR,98% 人核因子κB(NF-κB)試劑盒 Human NF-κB ELISA Kit
L-異亮氨醇 L-Isoleucinol 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA檢測(cè)試劑盒HumaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 96T/48T
L-亮氨醇 L-Leucinol 質(zhì)量規(guī)格:>97%,油狀 人核因子κB抑制物激酶α(IKK-α)試劑盒 Human IKK-α ELISA kit
N-Boc-L-亮氨醇 Boc-Leucinol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人核因子κB抑制物激酶β(IKK-β)試劑盒 Human IKK-β ELISA kit
L-苯丙氨醇 L-Phenylalaninol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人標(biāo)記物(MA/Melan-A)試劑盒 Human Melanoma Marker A,MA/Melan-A ELISA Kit
L-色氨醇 L-Tryptophanol 質(zhì)量規(guī)格:0.97 人活性抑制蛋白(MIA)試劑盒 Human melanoma-inhibiting activity protein,MIA ELISA Kit
Fmoc-纈氨醇 Fmoc-Valinol 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人試劑盒 Human melanoma ELISA Kit