產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3285 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
禽病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo) | Avian Herpesvirus 2(Gallid Herpesvirus2、GaHV2)2PCR | BKP3285 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Tigecycline 中文名: 分子式:C29H39N5O8 Human Aquaporin 1 英文名稱(chēng): Human Aquaporin 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): AQP-1
Tiamulin 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白 英文名稱(chēng): Human Asporin1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): ASPN1
Tiagabine hydrochloride 中文名:鹽酸噻加賓 分子式:C20H26ClNO2S2 載脂蛋白E 英文名稱(chēng): apolipoprotein/apoprotein E 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): APOE
Thiamphenicol 中文名:甲砜霉素 分子式:C12H15Cl2NO5S 載脂蛋白P 英文名稱(chēng): Apolipoprotein P 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): ApoP
Thevetin B 中文名: 分子式:C42H66O18 生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子 英文名稱(chēng): Angiopoietin Growth Factors 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): AGF
n-Butyl-β-D-fructopyranoside 67884-27-9 中文名: 分子式:C10H20O6 Human plasminogen activator (PLGA) ELISA Kit 人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒
3'-Hydroxygynuramide II 1401093-57-9 中文名: 分子式:C42H83NO6 Humanai-IgEreceptoraibodyELISAKit 人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Senkyunolide S 172723-28-3 中文名: 分子式:C12H16O5 Humandenguefeveraibody,DFELISA試劑盒人抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Senkyunolide R 172549-37-0 中文名: 分子式:C12H16O5 組織JNK3激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Senkyunolide E 94530-83-3 中文名: 分子式:C12H12O3 Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit人胎盤(pán)核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
禽病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)磷脂酶A2激活肽 Phospholipase A2 ActivatingPeptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱(chēng)RatCA125ELISAKit大鼠標(biāo)志物(CA125)規(guī)格:96T/48T
泡蛙肽 Physalaemin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)膠原蛋白酶譜法(collagen-zymography)電泳分析試劑盒(MMP1/13)5
PKI-tide PKI-tide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitSLE人規(guī)格:48T/96T
血小板因子4 Platelet Factor 4 (58-70)(human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠肥大細(xì)胞類(lèi)胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒 ,英文名: MCT ELISA Kit
Pneumadin,人 Pneumadin (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA檢測(cè)試劑盒RatCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 96T/48T
Pneumadin,大鼠 Pneumadin (rat) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人白介素2(IL-2)試劑盒 Human IL-2 ELISA kit
朊病毒肽(106-126),人 Prion Peptide (106-126),Human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱(chēng)MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorIELISAKIT小鼠可溶性受體I(TNFsRI)規(guī)格:96T/48T
前腎上腺髓質(zhì)素(1-20),人 Proadrenomedullin (1-20)(human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PEPCIN酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50
前腎上腺髓質(zhì)素(45-92),人 Proadrenomedullin (45-92)(human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Porcinetelomerase,TEELISA試劑盒豬端粒酶(TE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白激酶C(19-31) Protein Kinase C (19-31) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠肥大細(xì)胞類(lèi)糜蛋白酶1(CMA1)ELISA試劑盒 ,英文名: CMA1 ELISA Kit
L- L-Tartaric acid 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 動(dòng)物組織石蠟切片糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(lán)(ALCIANBLUE)染色試劑盒50
二甲基脲 N,N'-Dimethylurea 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動(dòng)物組織同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
氧化鎳 Nickel(II) oxide green 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 動(dòng)物組織同還原酶1A(aldo-ketoreductase1A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
吩嗪 Phenazine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動(dòng)物組織同還原酶1B(aldo-ketoreductase1B)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
檸檬酸三鉀一水 Potassium tribasic, monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 動(dòng)物組織同還原酶1C(aldo-ketoreductase1C)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
氯化鍶六水 Strontium chloride, hexhydrate 質(zhì)量規(guī)格:AR,≥99% 動(dòng)物組織同還原酶1D(aldo-ketoreductase1D)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
硫酸鈣二水 Calcium sulfate, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 動(dòng)物組織同還原酶1E(aldo-ketoreductase1E)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
2'-脫氧胞苷'-5'-(dCMP) dCMP, 2'-Deoxycytidine 5'-monophosphate, free acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí) 動(dòng)物組織銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量檢測(cè)試劑盒20
DSS(分子生物學(xué)級(jí)) DSS 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí) 動(dòng)物組織微粒體組分分離試劑盒50
腺苷脫氨酶(15U/mg) Adenosine deaminase from calf spleen 15U/mg 質(zhì)量規(guī)格:15U/mg,進(jìn)口 動(dòng)物組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:禽病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。