產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3249 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
狷羚病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV11PCR | BKP3249 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Sulfadiazine 68-35-9 中文名:磺胺嘧啶 分子式:C10H10N4O2S 兔壞死因子-a(rabbit TNF-a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Rifampicin 13292-46-1 中文名:利福平 分子式:C43H58N4O12 兔干細(xì)胞因子(rabbit SCF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Dyphylline 479-18-5 中文名:二羥丙茶堿 分子式:C10H14N4O4 兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-a(rabbit TGF-a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Sulfamethazine 57-68-1 中文名:磺胺二甲嘧啶 分子式:C12H14N4O2S 兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(rabbit TGF-b1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Lomefloxacin hydrochloride 98079-52-8 中文名:鹽酸洛美沙星 分子式:C17H20ClF2N3O3 兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-b2(rabbit TGF-b2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Jacaranone 60263-07-2 中文名: 分子式:C9H10O4 Rat platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
3-Hydroxychimaphilin 33253-99-5 中文名:3-羥基梅笠草素 分子式:C12H10O3 Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit 人可溶性內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chimaphilin 482-70-2 中文名:梅笠草素 分子式:C12H10O2 HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISA試劑盒人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Prerubialatin 1667718-89-9 中文名: 分子式:C27H20O7 組織PAK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
(S)-4-Methoxydalbergione 2543-95-5 中文名:(S)-4-甲氧基黃檀醌 分子式:C16H14O3 Humanpermeabilityglycoprotein,P-gpELISAKit人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
狷羚病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒直銷2,7-二叔丁基芴(>98.0%(GC)) 2,7-Di-tert-butylfluorene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱RatDesminELISAKit大鼠結(jié)蛋白(Desmin)規(guī)格:96T/48T
9-芴酮(>98.0%(GC)) 9-Fluorenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 酵母V型ATP酶(VtypeATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
9-芴醇(>95.0%(GC)) 9-Fluorenol 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) ELISAKitAGEs人晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格:48T/96T
2-芴甲醛(>95.0%(T)) 2-Fluorenecarboxaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 小鼠酶1(PON1)ELISA試劑盒 ,英文名: PON1 ELISA Kit
2-羥基-9-芴酮(>90.0%(HPLC)(T)) 2-Hydroxy-9-fluorenone 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)(T) 人聚集蛋白(Agrin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAgrinELISAKit 96T/48T
2-硝基芴(>99.0%(HPLC)) 2-Nitrofluorene 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC) 大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)試劑盒 Rat Coisol ELISA Kit
9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC)) 9,9'-Spirobi[9H-fluorene] 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 英文名稱RatcalcitoningenerelatedpeptideELISAKit大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-氨基蒽(>98.0%(GC)(T)) 2-Aminoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 酵母β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
1-氨基蒽(>98.0%(GC)(T)) 1-Aminoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) ELISAKitextein人外顯肽規(guī)格:48T/96T
9-蒽(>95.0%(GC)) 9-Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠對(duì)基苯(PABA)ELISA試劑盒 ,英文名: PABA ELISA Kit
DL-乳酸(USP) DL-Lactic acid 質(zhì)量規(guī)格:88~92%,USP 動(dòng)物軟骨組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
檸檬酸三銨 Ammonium , tribasic 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,AR 動(dòng)物軟組織線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20
鉻天青S(Ind Grade) CAS, Chrome azurol S 質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade 動(dòng)物腮腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
5'-三胞苷二鈉鹽 Cytidine-5'-triphosphate (CTP), di salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí) 動(dòng)物上皮細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
纖維素酶(酶活>45 U/mg) Cellulase 質(zhì)量規(guī)格:酶活>45 U/mg,BC 動(dòng)物神經(jīng)組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
派洛寧Y(Ind Grade) Pyronin Y 質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade 動(dòng)物腎上腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
魚(yú)精蛋白硫酸鹽來(lái)源于鮭魚(yú) Protamine sulfate from Salmom 質(zhì)量規(guī)格:Grade II,sigma分裝 動(dòng)物組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
5--4-氯-3-吲哚基鹽鈉鹽(分子生物學(xué)級(jí)) BCIP, di salt 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí) 動(dòng)物糖蛋白刀豆蛋白A(ConA)樹(shù)脂法化試劑盒5
乙酸銅水合物(>99%,BR) Copper(II) acetate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 動(dòng)物糖蛋白電泳遷移檢測(cè)試劑盒5
肌酸鈉鹽四水 Creatine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動(dòng)物糖蛋白化學(xué)法完全糖基分解試劑盒20
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:狷羚病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。